AO DE LA PROMOCIN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y COMPROMISO CLIMTICO FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA

AO DE LA PROMOCIN DE LA INDUSTRIA RESPONSABLE Y COMPROMISO CLIMTICO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA

MEDIOS DE CULTIVO

CURSO: MICROBIOLOGA GENERAL Y PARASITOLOGA

CATEDRTICO: Mg. ADNI JEH INOCENTE BONILLA

ALUMNO: JARA MOYA DICK JAIME

MEDIOS DE CULTIVO BACTERIANOLos medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas optimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. El material alimenticio en el que crecen los Microorganismos es el Medio de cultivo, y el crecimiento de microorganismos es el Cultivo.

conceptoSon preparados que intentan reproducir artificialmente las condiciones del hbitat natural de los agentes bacterianos.Sus componentes deben cubrir todas las necesidades nutricionales de las bacterias que se van a estudiar e incorporar a una mezcla justa y equilibrada, el cual permitir el crecimiento y multiplicacin.

composicinSustancias que se les aade:AguaPeptonasHidratos de carbonoExtracto de carneExtracto de levaduraSuero o sangre de caballo liquido ascticoCloruro de sodioMinerales y otras sustanciasAgentes solodificantes

Agua: Componente bsico y universal para la vida.Peptonas: Obtenida por hidrolisis acida o enzimtica de protenas Denominadas segn:- Origen de Proteina:p.ej, de gelatina, carne, o de soja.-Enzima utilizada para su obtencin: p.ej, pepsina->pepsica, tripsina-> tripsica; o papana->papainica. Constituyen una fuente fundamentalmente de nitrgeno, de carbono y azufre.Hidratos de carbono: GLUCOSA, fructosa, maltosa, o sacarosa y almidn, todos estos constituyen tras la degradacin enzimtica por el microorganismo, una fuente de energa y carbono.Extracto de carne: Concentrado de productos hidrosolubles de la carne de composicin indefinida y que aporta elementos muy ricos en xantina e hipoxantina, glucgeno, acido lctico, vitaminas, oligoelementos, etc.

Extracto de Levadura: Producto de la hidrolisis acida o enzimtica de la levadura de pan o de cerveza, previamente lisada por calor. Fuente importante de aminocidos, vitaminas y otros factores de crecimiento.Suero o sangre de caballo o de carnero, liquido asctico y vitaminas: Elementos tiles para microorganismos exigentes.Cloruro de sodio: Equilibra la presin osmtica del medio a fin de evitar la lisis celular por choque osmtico.Minerales y otras sustancias que los microorganismos no pueden sintetizar:La hemina, acido glutmico, fosforo, calcio, hierro, manganeso, magnesio, etc.

Agentes solidificantes: Incorporados para medios de cultivos solidos o semislidos. - Agar: Polimero de algas rojas : Gelidium Corneum a menos de 45C se convierte en un gel resistente a la hidrolisis bacteriana. No se solidifica en medio acido. - Silicato sdico al 10% (Silicagel): Utilizado para medio acido, o para medios definidos. - Gelatina: Utilizado mas como prueba de identificacin de estas (deteccin de la gelatinasa) que como agente solidificante ya que algunas bacterias la hidrolizan Agar nutritivoEs muy til porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas. En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia espesa, con colonias difcilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente (w/v): 0.5 % Peptona 0.3 % extracto de carne/extracto de levadura 1.5 % agar 0.5% NaCl Agua destilada pH casi neutro (6.8) a 25 C.

Agar de sangreSe utiliza para el crecimiento de estreptococos. Agar nutritivo enriquecido con cloruro sdico o un preparado enriquecido con otras sustancias como Columbia o el tripticase de sojaLa adicin de sangre a un medio de cultivo puede solucionarse calentando la sangre para romper los eritrocitos y para que se destruyan las sustancias inhibidoras, que son termolbiles.

Se obtiene calentando la sangre antes de adicionarla al medio base. Por esta razn el agar chocolate contiene hemoglobina, que aporta importante elemento para el crecimiento: el factor X o hemina termoestableEl Agar Chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de Neisserias (gonococos ymeningococos) y Haemophilus, pero en l pueden crecer muchos otros microorganismos exigentes.

AGAR CHOCOLATE

AGAR C.L.E.DEl medio C.L.E.D. (Cistina Lactosa Electrlito Deficiente) est recomendado para el recuento e identificacin presuntiva de los microorganismos de las vas urinarias. Su bajo contenido en electrolitos evita la invasin de los cultivos por Proteus.La presencia de lactosa en su composicin le confiere el carcter de medio diferencia;Colonias Lactosa +: AmarilloColonias Lactosa -: Verdoso

Agar s.s.Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia.

Agar HektoenEs un medio ms diferencial y menos selectivo que el agar SS. Se utiliza para facilitar el aislamiento de las enterobacterias.La presencia de tres azcares (lactosa, sacarosa y salicilina ) permiten ampliar el poder diferencial de este medio.

Medio de LoefflerEs un medio especfico para el cultivo de Corynebacterium difteriae.

AGAR CHAPMAN O MANITOL SALINOPermite el crecimiento de un determinado grupo de bacterias mientras que inhibe el crecimiento de otras.Este medio es importante en el laboratorio clnico debido a que es capaz de distinguir los microorganismo patognicos en un corto periodo de tiempo. Contiene una alta concentracin (~7.5%-10%) de sal (NaCl), hacindolo selectivo para Staphylococci (y 'Micrococcaceae) debido a que el nivel de NaCl es inhibitorio para la mayora de las bacterias.

preparacin

preparacinPara preparar un medio de cultivo, las sustancias que lo componen se disuelven en agua, se calientan para favorecer la disolucin de la mezcla y, una vez obtenida una solucin homognea se ajusta al ph optimo.

Como se cultivan las bacteriasLas bacteria se pueden cultivar en el laboratorio gracias a los denominados cultivos de bacterias.Un cultivo de bacteria es una tcnica que aprovecha la capacidad de divisin celular que tienen las bacterias para obtener gran cantidad de bacterias a partir de unas pocas.

Para realizar un cultivo de bacterias es necesario preparar un medio de cultivo.Un medio de cultivo es una mezcla de nutrientes, por ejemplo, de azcares, protenas, sales, vitaminas, agua, etc.EJEMPLO DE UN CULTIVO SLIDOPara conseguir un cultivo slido, se aade a la mezcla de nutrientes y agua una sustancia que le de una consistencia gelatinosa.El medio se prepara en las llamadas placas petri, que son unas cajas de vidrio o cristal.

PLACA PETRIMEDIO DE CULTIVO SLIDOEn este medio de cultivo, las clulas crecen adheridas a la superficie.

CLULASMEDIO DE CULTIVO SLIDOCondiciones de cultivoPara conseguir el cultivo microbiano se debe respetar las condiciones de incubacin adecuada.TEMPERTURA: En general, salvo para algunas bacterias especiales la optima para el crecimiento bacteriano es de 36 1 C. se consigue mediante estufas de cultivo.ATMOSFERA: esta depende del tipo de respiracin que posee el microorganismo.PRESION OSMOTICA: Los medios de cultivo llevan una concentracin NaCl del 1% suficiente para lograr la osmolaridad requerida para la mayora de las bacterias.HUMEDAD: Favorece el crecimiento de todos los microorganismos.PH: La mayora de las bacterias crecen muy bien a ph cercanos a la neutralidad.

Clasificacin de los medios de cultivo1. SEGN SU CONTENIDO:Definidos o sintticos: se conoce perfectamente la composicin qumica, ya que se elaboran aadiendo productos puros e individualizados.No sintticos o empricos: no se conoce la composicin exacta; se prepara con extractos de carne, de levadura, peptosas, etc.

clasificacin2. SEGN SU ESTADO:Lquidos: reciben el nombre de caldos, como por ejemplo caldo tioglicolato, caldo de cerebro corazn, caldo nutritivo o caldo Schaedler.Semislidos: contienen agar en escasa proporcin ( menos del 1% ).Solidos: se obtienen agregando agar al medio liquido en una cantidad suficiente para que solidifique (generalmente de 1.5 a 2 %).

clasificacin3. SEGN SU UTILIZACION EN LABORATORIO:Bsicos o comunes: son aptos para bacterias no exigentes y contienen los nutrientes mnimos para el desarrollo.Enriquecidos: son medios bsicos que se suplementan con sustancias muy nutritivas para bacterias exigentes.Selectivos: permiten el crecimiento de algunas bacterias e inhiben el de otras.Diferenciales: estos medios llevan incorporadas determinadas sustancias que pondrn de manifiesto visualmente la presencia de alguna caracterstica bioqumica de la bacteria

Control de los medios de cultivoCONTROL DE ESTERILIDAD: se efecta incubando algunas placas o tubos con caldo, escogidos del lote al azar que es el 5%, durante dos das a 35 C y 5 das a temperatura ambiente.CONTROL DE CALIDAD: Se utilizan por lo menos dos microorganismos distintos uno que crece sobre el medio y da resultados positivos y otro que no crece y da resultados negativos.CONTROL DE CADUCIDAD: es imprescindible rotular las placas con la fecha de preparacin.

Los medios de cultivo en el diagnostico directo de las enfermedades infecciosasMediante el diagnostico directo el laboratorio de microbiologa trata de poner de manifiesto la presencia de los agentes patgenos que causan una enfermedad infecciosa en una muestra clnica o bien en sus productos, antgenos o cidos nucleicos. Los procedimientos para llevarlo a cabo incluyen mtodos dependientes e independientes de cultivo. Entre estos ltimos estn la observacin microscpico, la deteccin de compontes antignicos y no antignicos.Para tal diagnostico, deber precisarse que los protocolos dependern de las caractersticas de la muestra y del propio laboratorio.Esta muestra llegara al laboratorio tal cual (ejem: escobillones en medio de transporte).A partir de su recepcin de procesamientos particulares el uso de los medios de cultivos comprende el empleo de aquellos que permiten el rencuentro bacteriano , no necesariamente y especialmente medios lquidos y solidos.

Esta muestra llegara al laboratorio tal cual (ejem: escobillones en medio de transporte).

A partir de su recepcin de procesamientos particulares el uso de los medios de cultivos comprende el empleo de aquellos que permiten el rencuentro bacteriano , no necesariamente y especialmente medios lquidos y solidos.

La observacin del aspecto de las colonias que se deben analizar son las siguientes:Tamao: pueden ser grandes, medianos, pequeos o puntiformes.Color: se debe a la produccin de pigmentos por parte de la bacteriaBordes: pueden ser ntidos o delimitadosSuperficie: Son planas, cncavas, convexas.Consistencia: son lisas o S. , rugosas o R. y mucosas o M.Hemolisis: se debe a la destruccin de la hemoglobina en medios que llevan sangre y permiten clasificar a las bacterias segn el tipo que produce.

conclusinLlegamos a la conclusin de que uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorioLos medios de cultivo bacteriano requieren una variedad de condiciones especiales ya sean fsicas o qumicas para su desarrollo, crecimiento y multiplicacin.