polimorfismo del gen mad 1 en una poblacion infantil lojana
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POLIMORFISMO DEL GEN MAD 1 EN UNA POLIMORFISMO DEL GEN MAD 1 EN UNA
POBLACION INFANTIL LOJANAPOBLACION INFANTIL LOJANA
Autor: Milton Leonardo Yaguana Cuenca
Loja – Ecuador
Mitosis
Adecuada Segregación Cromosómica
CHECKPOINT Inestabilidad Cromosómica
A N E U P L O I D I A S
MITOTIC ARREST DEFICIENT 1 (MAD 1)
• Polipéptido 718 aa
• Codifica una proteína de 83 kDa MAD1
MAD2
CDC20
MAD1
APC/C
En condiciones normales…En condiciones normales…
SEPARASASEPARASA
SE
CU
RIN
A
CDC20
APC/C
MAD2
MAD1
SEPARASASEPARASA
SE
CU
RIN
A
Cuando se detecta un error…Cuando se detecta un error…
POLIMORFISMO MAD1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19+?
0.414.43 2.66 3.12
1.291.670.162.61
64k 80k 23k 12.4k 21.3k 22.7k
...gcc agg cag cgc ctg cgc gag gac cac agc cag ctg cag gcg gag tgc gag cga ctg cgc ggg ctc ctg cgc...
A R Q R L R E D H S Q L Q A E C E R L R G L L R
...gcc agg cag cgc ctg cac gag gac cac agc cag ctg cag gcg gag tgc gag cga ctg cgc ggg ctc ctg cgc...
A R Q R L H E D H S Q L Q A E C E R L R G L L R
553 576558558R
558H
Zipper de LeucinaZipper de Leucina
Zipper de LeucinaZipper de Leucina
Iwanaga, et al. (2002). J. Biol. Chem. 277(34): 31005-13.
OBJETIVOS
GENERAL:
Determinar el polimorfismo del gen Mad1 en niños menores de 12 años que acudieron al laboratorio clínico de la Unidad de
Medicina Familiar (UMF) de la UTPL.
ESPECIFICO:
Determinar la frecuencia del polimorfismo del gen Mad1 en niños menores de 12 años acudieron laboratorio clínico de la Unidad de
Medicina Familiar (UMF) de la UTPL.
MATERIALES Y MÉTODOS
Análisis de Resultados
Obtención de Sangre Periférica
Extracción DNA Genómico
PCR
Digestión con Enzimas de Restricción
Determinación
del genotipo
Cálculo de frecuencias
Equilibrio Hardy-Weinberg
X 2-Cuadrado
Amplificación del Exon 17 del Mad1
Fragmento de 241 pb
Digestión con Mvn I
4343
CGCGCGCG
CACGCACG
136136
9494 42421212
5050
43435050
558 G (R)558 G (R)
558 A (H)558 A (H)
1212
GG AA GA
FrecuenciaFrecuencia
GenotípicaGenotípica
GA
GG
AA
Nº. Ind.
2929
1818
99
%
51.7951.79
32.1432.14
16.0716.07
51,79
32,14
16,07
0
10
20
30
40
50
60
PO
RC
EN
TA
JE
GA (Het) GG (WT) AA (Mut)
GENOTIPO
Frecuencia Genotípica MAD1
RESULTADOS Y DISCUSION
FrecuenciaFrecuencia
AlélicaAlélica
G
A
%
42.042.0
58.058.0
FRECUENCIA ALELICA MAD1
G58%
A42%
Genotipo Observado Esperado (O-E) (O-E)2 (O-E)2/E
GG 18 18.86 -0.86 0.7396 0.03922
GA 29 27.28 1.72 2.9584 0.1084
AA 9 9.86 -0.86 0.7396 0.0750
Total 56 0 X2 = 0.22
p = 0.70
ANALISIS ESTADISTICO:
CONCLUSIONES
Se observo un grado de expresión mayor del genotipo heterocigoto (GA = 51.79%), comparado con los otros genotipos homocigotos dominante y recesivo (GG = 32.14% & AA = 16.27%), respectivamente.
Por tanto no :
La variante polimórfica del gen La variante polimórfica del gen Mad1Mad1 es muy es muy frecuentefrecuente
No es resultado del proceso de transformación No es resultado del proceso de transformación malignamaligna
Hay PolimorfismoHay Polimorfismo
PERSPECTIVAS
Screening genéticoScreening genético
Determinar el genotipo Determinar el genotipo
Efectos de mad1 normal y mutanteEfectos de mad1 normal y mutante
AnálisisAnálisis
Nocodazol Nocodazol
AnálisisAnálisis