[Communiqué au Conseil et aux Membres de la Société.]

M B B à S Y À Z C B ïV E i

C. 156. M. 78. 1923. III.fC. H. 48.J

G e n è v e ,

le 8 février 1922.

Société des Nations

Deuxième Conférence internationale

de la Standardisation des sérinns et des réactions sérologiquesconvoquée par le Comité d’Hygiène de la Société des Nations et tenue

du 20 au 26 novembre 1922

A

L Ï N S T I T B f P A S T E U R , P A R I S

League of Nations

Second International Conference on the Standardisation of Sera and Serological Tests

convened by the Health Committee of the League of Nations and held from

November 20th to 26th, 1922

A T T H E

P A S T E U R I N S T I T U T E , P A R I S

SOCIÉTÉ DES NATIONS

DEUXIÈME CONFÉRENCE INTERNATIONALE DE LA STANDARDISATION DES SÉRUMS ET DES RÉACTIONS SÉROLOGIQUES

convoquée par le Comité d’hygiène de la Société des Nations et tenue du 20 au 26 novembre 1922, à l ’Institut Pasteur, à Paris.

R A PPO R T

1. Le Comité d ’hygiène de la Société des Nations ayant reconnu la grande im portance pratique et l’intérêt international que présente la standardisation des sérums et des réactions

sérologiques, avait, a u cours de sa session de Paris, en octobre 1921, décidé, sur la proposition

de son président, le professeur M a d s e n , de procéder à des enquêtes expérimentales à c e t effet

et de confier ces enquêtes aux laboratoires d’É tat e t aux instituts nationaux s u i v a n t s :

Grande-Bretagne :

M e d i c a l R e s e a r c h C o u n c i l

France :

I n s t i t u t P a s t e u r

Italie :

I n s t i t u t d e l ’E t a t

Pologne :

I n s t i t u t é p i d é m i o l o g i q u e d e l ’E t a t ,

V a r s o v i e

Suisse :

I n s t i t u t d ’h y g i è n e , B a l e

Belgique :

I n s t i t u t P a s t e u r , B r u x e l l e s

Japon :

g § H I n s t i t u t K i t a s a t o

Etats-Unis :

L a b o r a t o i r e d ’h y g i è n e d e W a s h i n g t o n

I n s t i t u t R o c k e f e l l e r

Autriche :

Allemagne :

I n s t i t u t d e p a t h o l o g i e e x p é r i m e n t a l e ,

F r a n c f o r t

I n s t i t u t d e r e c h e r c h e s s u r l e c a n c e r ,

H e i d e l b e r g

I n s t i t u t R o b e r t K o c h , B e r l i n

Recherches dans lesquelles ces insti­tuts et laboratoires sont spécialisés.

Sérum aiitidysenterique» antiméningococcique,

Sérodiagnostic de la syphilis.

Sérum antitétanique,» antidiphtérique,» antiméningococcique, » antipneumococcique, » antidysenterique.

Sérum antitétanique.

Sérum antidysenterique, Sérodiagnostic de la syphilis.

Sérum antidysenterique.

Sérodiagnostic de la syphilis.

Sérum antidysenterique.

Sérum antitétanique,» antidiphtérique,». antiméningococcique,» antipneumococcique

Sérodiagnostic de la syphilis.

Sérum antidiphtérique » antitétanique.

Sérodiagnostic de la syphilis.

Sérodiagnostic de la syphilis. Sérum antiméningococcique.

» antipneumococcique.

— 3 —

En vue de discuter et d ’établir un programme commun d’enquête, le Comité avait en outre décidé de'convoquer une conférence de représentants des laboratoires et des [instituts en question. Cette conférence qui se tin t au Ministère de l’hygiène, à Londres, du 12 au 14 décem­bre 1921, forme quatre Sous-Commissions chargées respectivement d’étudier la question en ce qui concerne :

1° Les sérums antidiphtérique et antitétanique ;2° Les sérums antiméningococcique et antipneumococcique ;3® Le sérum antidysentérique ;4° Le sérodiagnostic de la syphilis.

Les résolutions adoptées par les Sous-Commissions, définissaient la méthode à suivre dans les recherches expérimentales ; ces recherches devaient être entreprises à bref délai et simulta­nément par les différents instituts nationaux et laboratoires d’É ta t et leurs résultats devaient être centralisés par l’Institut sérothérapique de l’É ta t danois.

Il fut, en outre, décidé que le président convoquerait, le cas échéant, des conférences par­tielles pour discuter des problèmes spéciaux et qu une seconde conférence aurait lieu à 1 Ins­titut Pasteur, à Paris, lorsque l’état des enquêtes permettrait de comparer les résultats obtenus.

2. Lors de la cinquième séance de la quatrième session du Comité d’hygiène, tenue à Genève du 14 au 21 août 19221, le professeur M a d s e n déclara que, si les recherches étaient particulièrement avancées pour les sérums antitétanique et antidiphtérique, il n’en était pas de même pour .les autres sérums. Pour le sérodiagnostic de la syphilis, en particulier, d’autres expériences étaient indispensables.

Le Comité autorisa son président à convoquer telle réunion qu’il pourrait juger nécessaire et à s’assurer, en cas de besoin, la collaboration d’autres instituts ou spécialistes qu’il estimerait devoir être consultés.

3. La Sous-Commission des sérums antidiphtérique et antitétanique se réunit à Genève du 25 au 27 septembre en vue de comparer les résultats obtenus dans l’étude de ces sérums. Les différents instituts qui avaient entrepris des recherches comparatives à l’invitation du Comité d’hygiène étaient représentés par les personnalités suivantes :

Président du Comité d’hygiène : Prof. T h . M a d s e n , Directeur de l’Institut sérothérapiquede l’E ta t danois, Copenhague.

Président de la Sous-Commission des sérums antidiphtérique et antitétanique : Prof. LouisM a r t i n , sous-directeur de l’Institut Pasteur, Paris.

Membres: Prof. B. Gosro, chef du Laboratoire de bactériologie, Direction générale de laSanté à Rome.Professeur W. K o l l e , directeur de l’Institut de pathologie expérimentale, Francfort.M. G. W. McCo y , directeur du Laboratoire de l’hygiène, Washington.Professeur M. M iy a j i m a , d e l’Institut Kitasato, Tokio.

Le prof. T a r a s s e v it c h , représentant l’Institut d’E tat chargé du contrôle des sérums à Moscou, assistait aussi à la Conférence.

Après avoir pris connaissance des résultats obtenus à la suite des expériences concernant le sérum antidiphtérique, faites à Francfort par l’Institut de pathologie expérimentale, à Paris par l’Institut Pasteur, à Rome par le laboratoire de bactériologie de l’E tat, à Washing­ton par le Hygienic Laboratory, à Copenhague par l’Institut sérothérapique de l’E tat, la Sous- Commission a reconnu que l’unité d ’Ehrlich devrait être définitivement adoptée comme étalon international du titrage des sérums antidiphtériques. Elle a adopté, en outre, une résolutioninvitant le prof. M a d s e n , chargé par ailleurs de centraliser les recherches, à provoquer chaqueannée des expériences comparatives entre ces sérums.

En ce qui concerne le sérum antitétanique, la Sous-Commission a conclu :a) Que les recherches comparatives faites aux Instituts de Copenhague, de Francfort,

de Paris, de Rome et de Washington amenaient à recommander le principe d’une nouvelle unité internationale basée sur l’unité américaine ;

b) Qu’il restait encore à établir définitivement, au moyen d’une série d'expériences, les rapports exacts existant entre les différents sérums employés pour le titrage en antitoxine du sérum antitétanique et qu’on devrait, à cet effet, recourir uniquement aux procédés basés sur la neutralisation de la toxine par l’antitoxine tétanique (Annexe).

4. Le président du Comité d’hygiène ayant estimé, d’après les résultats des rapports -, que l’état des recherches nécessitait La réunion des représentants des laboratoires et instituts auxquels elles avaient été confiées, afin de comparer les résultats obtenus et de mettre au point les détails des recherches à poursuivre, convoqua pour novembre 1922 une deuxième Confé­rence internationale de la standardisation des sérums et des réactions sérologiques. Confor­mément à la décision de la première Conférence et comme suite à l’invitation de l’Institut Pasteur, de Paris, c’est à cet Institut que s’est réunie la deuxième Conférence. Elle a siégé du 20 au 26 novembre 1922.

1 Procès-verbaux de la quatrième session du Comité d’hygiène. (C. 555. M. 337. 1922. III, page 28.) * Ces rapports seront publiés séparément.

s - d. N . 150. 12-22. + 250. 1-23. + 800. 2-23. Imprimerie d’Ambilly.

— 4 —

La Conférence s’est ouverte le 20 novembre 1922, sous la présidence de M. Strauss ministre français de l’Hygiène et de la Prévoyance sociale. Le. prof. Roux, Directeur de]’lns! titu t Pasteur, a souhaité la bienvenue aux délégués e t dit toute sa satisfaction de voir réunis dans la maison du grand Pasteur des savants éminents venus de trois continents ; il a exprimé l’espoir que cette collaboration internationale serait couronnée du succès le plus complet et servirait d ’exemple dans d’autres domaines que le domaine scientifique.

Le prof. M a d s e n remercia le ministre de l’Hygiène d’avoir bien voulu honorer de sa pré­sence les travaux de la Conférence. Il exprima au professeur R oux la gratitude de ses collègues et la sienne et il invita les assistants à se lever pour honorer la mémoire du grand savant dont on va célébrer le centenaire.

M . S t r a u s s remercia le prof. M a d s e n de l’hommage rendu à la mémoire de Pasteur. H félicita les délégués du dévouement avec lequel ils ont, sous les auspices de la Société des Nations, poursuivi leurs recherches, en vue de réaliser une unité de méthode dont la portée sera considérable, et il les assura du vif intérêt que prend le Gouvernement français au succès de leurs travaux.

Le prof. M a d s e n , prenant alors place au fauteuil présidentiel, se félicita de retrouver à la Conférence, à l’exception du D r D o u g l a s et du D r G o r d o n , dont il regrette l’absence, tous les savants qui, sur l’invitation du Comité d’hygiène, ont,entrepris des recherches suivant le programme tracé par eux à la Conférence de Londres.

Il nota avec satisfaction que l’Office international d’hygiène publique qui avait été repré­senté à Londres par le président du Comité, M. Velghe, a délégué à la présente Conférence son sous-directeur, le Dr P o t t e v i n , sénateur, et le Dr A b t .

Il salua de nouveaux collaborateurs en la personne du Dr M u t e r m il c h et de ses collègues de l’Institut Pasteur, des prof. B o r d e t , de Bruxelles, von W a s s e r m a n n et N e u f e l d , de Berlin, du Dr W a d s w o r t h , représentant de l’Institut Rockefeller, ; de New-York ; des professeurs H i d a , représentant de l’Institut Kitasato, de Tokio, T a r a s s e v it c h , représentant l’Inst1 ut d’E ta t chargé du contrôle des sérums, à Moscou, et Ca n t a c u z è n e , directeur de l’Institut de médecine expérimentale de Bucarest.

Il exposa ensuite les difficultés que la Conférence avait à surmonter avant d ’arriver à des résultats pratiques. Sur sa proposition, la Conférence décida de former immédiatement les cinq Sous-Commissions suivantes :

Sous-Commission des sérums antidiphtérique et antitétanique ;Sous-Commission du sérum antiméningococcique ;Sous-Commission du sérum antipneumococcique ;Sous-Commission du sérum antidysentérique ;Sous-Commission du sérodiagnostic de la syphilis.

Ces Sous-Commissions ont siégé du lundi 20 au vendredi 24 novembre.

La Conférence a tenu une seconde séance plénière le samedi 25 novembre, au cours de laquelle elle a adopté à l’unanimité les résolutions suivantes, présentées par les différentes Sous-Commissions.

SÉRUM ANTIDIPHTÉRIQUE.

La Sous-Commission adopte toutes les propositions contenues dans le rapport du Dr M a d s e n , sur la conférence de Genève (Annexe).

Après avoir adopté l’unité d’Ehrlich comme unité internationale, il serait très intéres­sant d’obtenir que les fabriques fournissent dans tous les pays des flacons contenant les mêmes quantités d’unités antitoxiques, pour les injections préventives ou thérapeutiques.

Il a été décidé qu’on ferait d’abord une enquête pour savoir combien d’unités antitoxiques contiennent les flacons actuellement mis en vente.

Le Comité d ’hygiène de la Société des Nations demandera des échantillons de flacons aux divers instituts et fabriques et fera connaître les résultats de l’enquête lors d’une prochaine réunion.

SÉRUM ANTITÉTANIQUE.

Les résolutions de la Conférence de Genève (Annexe) sont approuvées.La rédaction du dernier paragraphe du titre 3 (tétanos) est modifiée de la façon suivante :

« La décision de la Conférence de Genève implique la nécessité de p o u rsu iv re les expériences en vue de préciser la technique à employer pour titrer les sé ru m s antitétaniques avec le nouvel étalon ».

SÉRUM ANTIMÉNINGOCOCCIQUE.

En vue d’arriver à une classification et à une nomenclature internationales plus uniformes des méningocoques, la Sous-Commission décide :

I. Qu’il sera procédé à un échange de cultures de méningocoques et de sérums monova­lents antiméningococciques entre les différents laboratoires.

Différentes souches de méningocoques seront choisies par les différents laboratoires et un sérum monovalent sera préparé par injection de ces souches à des animaux.

II. La classification des méningocoques sera basée autant que possible :a) Sur une division primaire en groupes qui seront désignés par des numéros, comme, par

exemple, I, II (selon la classification actuelle des types de Gordon), sans préjudice des autres groupes qui pourront être déterminés ;

b) Sur une sous-division des groupes principaux en groupes secondaires ou types ; ceux-ci seront désignés par des lettres accompagnées du numéro du groupe principal dans lequel ils doivent être classés, par exemple, la, IIZ>, etc.

La division primaire en groupes sera basée exclusivement sur l’agglutination. Les groupes comprennent des cultures qui sont agglutinées d’une façon uniforme en une dilution d’un titre élevé de sérums monovalents ne contenant que peu de coagglutinines.

La division secondaire en types pourra être basée sur les résultats des réactions d ’aggluti­nation et d ’absorption pratiquées avec un sérum monovalent.

Les cultures qu’il sera impossible d ’identifier d ’une manière précise seront classées dans un groupe « X ».

Pour les études concernant la standardisation des sérums thérapeutiques, la Sous-Com- mission décide également que :

1° De nouveaux essais seront poursuivis avec des sérums monovalents et polyvalents pour déterminer la teneur comparée en agglutinines, ambocepteurs, opsonines et antitoxines. On emploiera des sérums prélevés respectivement à différentes dates après la dernière injection. Les sérums devront provenir du cheval et ne seront pas chauffés. Des indications précises seront données sur le mode de préparation du sérum, la date de la saignée, l’addition d ’anti­septiques et, si possible, les résultats thérapeutiques obtenus chez l’homme avec les mêmes sérums.

En principe, on se servira pour ces expériences des souches ayant servi à l’immunisation des chevaux.

Seuls les méningocoques provenant du liquide céphalo-rachidien seront utilisés.2° On étudiera l’action du chauffage et en particulier de la tyndalisation (56° C. pendant

une heure et trois jours de suite) sur les propriétés du sérum.3° Il y aurait lieu d’étudier avec soin les réactions d ’immunité des méningocoques récem­

ment isolés dans les cas où le sérum s’est montré inefficace.4° L ’échange des cultures et des sérums se fera par l’intermédiaire de l’Institut central

de Copenhague.

SÉRUM ANTIPNEUMOCOCCIQUE.

I. — La Sous-Commission considère que la classification des pneumocoques en différents types sérologiques est la base de toute recherche ultérieure concernant la sérothérapie, la vacci • nation et l’épidémiologie, et accepte comme types-étalon pour les recherches internationales les trois types principaux I, II, III d finis par les savants de l’Institu t Rockefeller. Les échan­tillons non conformes à ces trois types devront être classés provisoirement dans un groupe « X ».

Les pneumocoques pouvant, dans certaines circonstances, subir une altération de leurs ca-actères immunologiques, la classification des types, dans les études épidémiologiques, devra être basée sur l’agglutination de souches récemment isolées, ou de préférence sur l’agglu­tination de l’exsudat péritonéal chez la souris après injection de crachats ou autres produits pathologiques.

II. — En ce qui concerne la répartition des types de pneumocoques dans les différents pays du monde, la Sous-Commission exprime le vœu qu’en outre des r cherches ultérieurement poursuivies en Europe et aux Etats-Unis, des recherchas analogues roient poursuivies dans les contrées tropicales et autres, où les conditions climatériques et sociales sont toutes différent s.

En premier heu, il conviendrait d’étudier des cas de pneumonie lobaire, mais il faudrait également recueillir des observations po.tant sur les autres form s de l’inf.ction pn un.ococ- cique.

— 6 —

III. — Il y aurait lieu d ’étudier dans des cas de pneumonie obseivés au déLut l’action thé apeutique de sérums antipneumocoeciques soigneusement titrés et rcconnu doués d’un pouvoir protecteur élevé vis-à-vis de la souris. Cette étude ne saurait être entreprise que dans des instituts pourvus de tous les moyens nécessaires.

IV. — Sans se prononcer sur la valeur thérapeutique du sérum dans le traitement de la pneumonie, la Sous-Commission estime que le titrage du sérum chez la souris avec l’emploi d ’un sérum étalon comme contrôle constitue une base suffisante pour la standardisation inter­nationale du sérum.

On peut titrer le sérum thérapeutique chez la souris, soit en injectant dans le péritoine une quantité fixe (0,2 cc.) de sérum mélangé à des quantités de culture très virulente en bouil­lon, variant de 0,1 cc. à 0,4 cc., ou plus, soit en injectant dans le péritoine des quantités va­riables plus faibles (0,001 cc. ou 0,0001 cc.) de sérum, et, trois heures après, une quantité moyenne de culture, par exemple, 0,0001 cc. La culture devra tuer la souris en 48 heures, à la do=e minimum de 0,000.0001 cc. Pour chaque titrage, on devra utiliser un sérum étalon.

V. — Il y aurait lieu d’instituer de nouvelles recherches sur le mécanisme de la guérison dans la pneumonie et sur le mode d’action du sérum antipneumococcique.

VI. — Il est désirable qu’on fasse l’étude du sérum antistreptococcique.

VII. — L’Institut central de Copenhague fournira les cultures-étalon, les sérums agglu­tinants et les sérums thérapeutiques-étalon.

SERUM ANTIDYSENTERIQUE.

La Sous-Commission décide que :

1° Il y a lieu de continuer des expériences pour déterminer le choix de l’animal à employer en vue de la standardisation du sérum antidysentérique. Ces expériences seront poursuivies comparativement sur des lapins de 1.500 à 1.600 grammes et sur des souris blanches de 15 à 16 grammes.

2° On emploiera comparativement la toxine liquide, la toxine solide (Wellcome) et les microbes tués par la chaleur :

a) La toxine liquide sera préparée par chaque laboratoire avec une culture de Shiga toxique qui sera livrée par l ’Institut Pasteur (filtrat d’une culture de vingt jours sur bouillon peptonisé (peptone Chapotaut) ensemencée dans des ballons d’un litre contenant 500 centimètres cubes de liquide, et ayant une alcalinité de PH. 7,4) ;

b) La toxine anglaise solide sera livrée par les laboratoires Wellcome ;c) Les microbes tués à 56 degrés pendant une heure et desséchés dans le vide seront livrés

par l’Institut Pasteur (culture sur agar émulsionnée dans l’eau physiologique). Les injections seront p ra t:quées comparativement saus la peau, dans le péritoine et dans les veines.

3° il n’y a pas lieu, dans les expériences à poursuivre, de distinguer le pouvoir antineuro- toxi ;ue et le pouvoir antientérotoxique du sérum.

4° Le t'trage des sérums se fera par mélange toxine-sérum, après contact d’une demi- heure à la température du laboratoire.

5° Il n’y a pas lieu de chercher à conférer au sérum un pouvoir antiinfectieux séparé du pouvoir antitoxique.

6° Il y a intérêt à expérimenter sur l’homme des sérums monovalents (anti-FIexner. anti- His, etc.) vis-à-vis des dysenteries à germe homologue.

SÉRODIAGNOSTIC DE LA SYPHILIS.

La Sous-Commission a siégé du 20 au 25 novembre.Le 20 novembre ont été présentés les rapports des neuf laboratoires chargés de l’étude com­

parative des réactions Bordet-Wassermann, Sachs-Georgi, Meinicke et Sigma.Le 21 novembre, les secrétaires de la Sous-Commission ont présenté un résumé de tous

ces rapports.Une discussion s’est engagée et diverses propositions ont été présentées par :

MM. les professeurs D r e y e r ,K o l l e .Sa c h s ,N e u f e l d .

Le 22 novembre, le D1' Y e r n e s a fait une démonstration de 'a technique de sa iréthode dont il a exposé les avantages.

— 7 —

Le Dr M u t e r m il c h a fait connaître, en quelques mots, les résultats obtenus à l’Instit P a s te u r par la méthode Bauer Hocht Weinberg. Il a, en outre, fait certaines propositions.tu

Le 23 novembre, le prof. M a d s e n a présenté à la Commiss'on un ensemble de projets derésolution.

A la suite de la discussion de ces projets de résolution, il a été const'tué une sous-com­mission des représentants des laboratoires qui participent aux recherches avec mandat de fixer la technique des méthodes Sachs-Georgi et Sigma.

Le 24 novembre, les propositions du prof. Map sen ont été adoptées et il a été décidé qu’elles serviraient de base aux résolutions définitives.

Des laboratoires ont été désignés en vue de réaliser la comparaison visée au paragraphe 2 de ces résolutions (voir plus bas).

Le 25 novembre, les résolutions ci après ont été adoptées :

I. La comparaison des quatre méthodes devra être poursuivie dans les conditions ci-après :a) La technique de la méthode Bordet-Wassermann employée dans les laboratoires

participant aux recherches sera la même que celle utilisée par eux jusqu’à ce jour ;b) La méthode Sachs-Georgi sera appliquée en se servant du même nombre de

tubes qu’auparavant, mais en se servant de deux quantités de sérum et d’un seul extrait, conformément aux détails techniques arrêtés par la Sous-Commission spé­ciale ;

c) En vue d’établir cette comparaison, il ne sera pas tenu compte du titrage quantitatif obtenu au moyen de la réaction Sigma. Il ne sera fait état que des résultats qualitatifs ;

d) En ce qui concerne la méthode Meinicke, les laboratoires ci-après désignés seront invités à poursuivre leurs recherches en liaison avec le Dr Meinicke :

Heidelberg (Prof. Sa c h s ),Vienne (Prof. M ü l l e r ),Copenhague (Prof. M a d s e n ) ;

e) Les laboratoires participant à l’ensemble des recherches seront invités à étudier comparativement l’influence des divers facteurs intervenant dans les réactions, notamment les facteurs résultant de la variété des antigènes employés ;

/) Il est entendu que les recherches porteront autant que possible sur 500 cas de sujets non syphilitiques et sur 500 cas de malades atteints de syphilis.

Ces cas appartiendront, dans la mesure du possible, à la syphilis primaire, à la syphilis latente ou à la syphilis tertiaire.

II. L ’Institut sérothérapique de l’E tat, à Copenhague, s’efforcera de réunir 500 prélè­vements de sérum syphilitique et 500 de sérum non syphilitique.

Ces prélèvements seront tous partagés en cinq parties égales dont chacune sera adressée aux laboratoires ci-après :

Pour l’Allemagne : Laboratoire d u prof, von W a s s e r m a n n ,Pour l’Autriche : Laboratoire d u prof. M u l l e r ,Pour la Belgique : Laboratoire du prof. B o r d e t ,Pour la Grande-Bretagne : Laboratoire du Dr H a r r i s o n ,Pour la Pologne : Laboratoire du prof. H i r s z f e l d .

De cette façon, il pourra être procédé à une comparaison des résultats obtenus dans tous ces laboratoires, qui se serviront de leur technique habituelle pour l’application de la méthode Bordet-Wassermann.

R A PPO R T D E LA SOUS-COMMISSION C H A R G ÉE D ’É T U D IE R LES D ÉTA ILS T E C H N IQ U E S.

I . M é t h o d e Sa c h s -G e o r g i .

Le sérum, après inactivation, doit être dilué à 20 ’/o avec une solution d’eau salée de 0,85. De cette dilution :

Placer dans le premier tube 1 cc.Placer dans le deuxième tube 0,5 cc. et ajouter 0,5 cc. de solution d’eau salée

physiologique.Placer dans le troisième tube (contrôle du sérum) 1 cc.

On n ’emploiera qu’un seul extrait. Ce sera l’extrait fourni par le prof. Sa c h s .

Dilution de l'extrait. — Si un intervalle de 30 secondes entre l’addition de la première et de la seconde quantité d’eau salée amène la floculation des extraits dilués, cet intervalle pourra être abrégé de façon à empêcher la floculation.

Incubation. —• De vingt à vingt-quatre heures dans l’étuve à 37 degrés.

I I M é t h o d e S ig m a .

a) On se servira de cinq tubes ; au cas où la quantité de sérum serait insuffisante, on pourra supprimer le premier tube ; si, ensuite, le résultat est positif, on pourra signaler le fait; s’il est négatif, il doit être supprimé de la série;

b) L ’extrait sera l’extrait fourni par le professeur Dreyer; il sera dilué exactement selon les indications données par Dreyer et Ward dans la description de leur méthode ;

c) Incubation. — Pendant l’incubation, il est essentiel que les tubes soient immergés de telle façon que la moitié au moins et les trois quarts au plus de la colonne de fluide de chaque tube se trouvent au-dessous du niveau de l’eau dans 1 bain-marie.

L ’incubation devra durer de vingt à vingt-deux heures au moins, et, dans le cas de réactiondouteuse ou négative, elle devra être prolongée jusqu’à quarante à quarante-quatre heures.

S ig m a .

Contrôle du sérum. — Si la quantité du sérum le permet, un contrôle contenant :10 gouttes de sérum,15 gouttes d ’alcool à 3% dans l’eau salée,

pourra être employé.

Si une quantité de floculation susceptible, de l’avis du sérologiste, de vitrer la réaction se produit dans ce contrôle, le résultat sera néanmoins signalé, mais il sera accompagné d’une note indiquant que le contrôle a montré la présence de la floculation et la quantité de flocula­tion qui s’est produite.

Chaque fois qu’on aura recours à un contrôle, on consignera le point attein t par le tube de contrôle.

I I I . E n r e g i s t r e m e n t d e s r é s u l t a t s .

Oxford et Heidelberg communiqueront des directives concernant les lectures qui doivent être considérées respectivement comme positives ou négatives.

Il est désirable d’étudier l’influence des divers facteurs, indiqués ci-dessous :1° Comparaison des extraits de Sachs et de Dreyer-Ward dans les deux méthodes2° Influence de la méthode suivie pour diluer les extraits dans les deux méthodes ;3° Comparaison de l’emploi de l’étuve et du bain-marie pour l’incubation ;4° Comparaison des effets de l’inactivation du sérum (1 /2 heure et 1 heure 1 /2) ;5° Comparaison entre l’emploi des tubes étroits de Dreyer et celui des tubes ordinaires

de Sachs-Georgi ;6° Comparaison des résultats obtenus dans la lecture des réactions par les deux méthodes

après 20-24 heures et 40-48 heures respectivement ;7° Etude des quantités relatives de sérums et d’extraits à employer ;8° Comparaison de l’emploi des pipettes et celui de compte-gouttes pour mesurer le sérum.

C. H. 41

Annexe.

R A P P O R T D U PROFESSEUR Th. M A DSEN

sur la

CONFÉRENCE SÉROLOGIQUE

TENUE A GENÈVE DU 25 AU 27 SEPTEMBRE 1922.

1. A sa quatrième session, le Comité d ’hygiène a signalé les progrès considérables réalisés dans l’étude des sérums antitétanique et antidiphtérique et a annoncé qu’une Conférence inter­nationale d ’experts se réunirait en septembre afin de comparer les résultats obtenus dans ce domaine. Le Comité d ’hygiène a autorisé son président à convoquer, s’il le jugeait nécessaire, une conférence composée de quelques savants. Cette conférence s’est tenue à Genève du 25 au 27 septembre.

Les différents instituts spécialisés dans ces recherches étaient représentés par les person­nalités dont les noms suivent :

Président du Comité d ’hygiène : Prof. Th. M a d s e n , directeur de l’Institut sérothérapique de l’É ta t danois, Copenhague, président du Comité d’hvgiène à la Société des Nations.

Président de la Sous-Commission des sérums antidiphtérique et antitétanique : Professeur Louis M a r t i n , sous-directeur de l’Institut Pasteur, Paris.

Membres : Prof. B. Gosio, chef du Laboratoire de bactériologie, Direction générale de la Santé à Bome.

Prof. W. K o l l e , directeur de l’Institut de pathologie expérimentale, Francfort.M. G. W. McCo y , directeur du Laboratoire de l’hygiène, Washington.Prof. M. M i y a j i m a , de l’Institut Kitasato pour maladies contagieuses, Tokio.Le prof. T a r a s s e v it c h , représentant l’Institut d’E ta t chargé du contrôle des sérums

à Moscou, assistait aussi à la Conférence.

2. Sérum antidiphtérique. — La Sous-Commission spéciale qui avait étudié cette question à la Conférence internationale de la standardisation des sérums et des réactions sérologiques, tenue à Londres en décembre 1921, avait adopté la résolution suivante relative à la diphtérie :

« Deux étalons sont actuellement employés. Des recherches préliminaires permettent de penser qu’il existe peu de différence entre l’unité d’Ehrlich conservée à l’Institut de Francfort e t l’unité américaine fournie par le bureau de Washington.

« Si ce fait était bien établi, le problème recevrait une solution simple et rapide. Il y a intérêt à bien fixer ce point ; pour le faire, l’Institut de Francfort et le bureau de Washington fourniront aux différents laboratoires les . sérums et les toxines nécessaires à cette étude. Les résultats seront envoyés à l’Institut sérothérapique de l’E ta t danois, qui, pour ces recherches, fait fonctions de laboratoire central du Comité d’hygiène de la Société des Nations. »

Des expériences furent immédiatement entreprises, à Francfort, par l’Institut de patho­logie expérimentale; à Paris, par l’Institu t Pasteur; à Rome, par le Laboratoire de bactériologie; à Washington, par le Laboratoire de l’hygiène et, enfin, au Danemark, par l’Institut sérothé­rapique de l’É tat. Ces instituts ont comparé l’unité d’Ehrlich, conservée par l’Institut de Francfort, e t l’unité antitoxique, conservée par le Bureau de Washington, et ont reconnu qu’il n’y avait pas de différence notable entre ces deux unités.

Il est donc démontré que c’est l’unité d ’Ehrlich qui devra être définitivement adoptée comme étalon international du titrage des sérums antidiphtériques.

La Conférence de Genève a adopté la résolution suivante :« Pour s’assurer qu’il y aura toujours identité entre les différents sérums employés

par les E tats pour pratiquer les mensurations, il est désirable que le prof. M a d s e n , agis­sant comme directeur de l’Institut sérothérapique de l’E ta t danois, qui, pour ces recherches fait fonctions de Laboratoire central du Comité d ’hygiène de la Société des Nations, pro­voque chaque année des expériences comparatives entre ces sérums. »

Les comptes rendus authentiques des expériences auxquelles se sont livrés les différents instituts sont sur le point d’être publiés et paraîtront en même temps que ceux qui ont tra it aux expériences relatives aux étalons de sérums antitétaniques.

— 10

Pour donner suite aux résolutions de la Conférence de Genève, l’Institut sérothérapique de l’E ta t danois recevra périodiquement des spécimens de sérums étalons en vue de les com­parer expérimentalement les uns aux autres. Les instituts des différents E tats pourront natu­rellement recevoir, sur demande adressée à Copenhague, un échantillon authentique du sérum étalon.

L’Institu t sérothérapique de l’E ta t danois procédera au moins une fois par an à un examen des sérums adoptés comme étalons par les différents Etats. Au cas où les expériences révé­leraient des variations de types, l’institut intéressé sera invité à procéder à des épreuves de comparaison expérimentale. En outre, il demeure bien entendu que tous les instituts auront entière liberté d envoyer à Copenhague des échantillons de leur sérum type à n’importe que] moment et pourron+ demander qu’il soit comparé expérimentalement à l’étalon international

3. Tétanos. — La Conférence internationale de sérologie tenue à Londres avait adopté la résolution suivante sur le tétanos :

« Quatre méthodes sont actuellement employées pour doser l’antitoxine tétanique Ces quatre méthodes n’ont pas les mêmes points de départ et les expériences n ’ontjpas encore établi l’exacte relation entre ces unités.

« La Sous-Commission estime qu’il est cependant possible d ’arriver à établir une commune mesure en choisissant d’un commun accord un sérum étalon unique et en utili­sant le procédé adopté pour le dosage du sérum antidiphtérique.

« En premier lieu, les laboratoires devront fixer par des expériences les relations qui existent entre les quatre unités employées actuellement.

« Pour arriver à ce résultat, il y aura lieu d’échanger les sérums et les toxines, afin d’établir des expériences comparatives. Pour chaque méthode, on décrira avec précision les détails des expériences. Tous ces documents seront envoyés à l’Institut de sérothé­rapie de l’É ta t danois, qui, pour ces recherches, fait fonctions de laboratoire central du Comité d ’hygiène de la Société des Nations.

« Ils seront discutés lors d’une prochaine conférence. »

Des expériences comparatives ont été effectuées au cours des neuf derniers mois par les Instituts de Copenhague, de Francfort, de Paris, de Rome et de Washington. Bien que ces expériences ne soient pas encore arrivées à leur stade définitif, elles ont néanmoins permis d’aboutir à une entente sur les bases d’un accord international.

Si l’on compare les résultats des expériences, on constate que les rapports entre les diffé­rents sérums sont à peu près les suivants :

En prenant le sérum allemand comme titran t 1, le sérum américain titrerait de 60 à 66 et le sérum français environ 2.500.

Les membres de la Conférence de Genève ont décidé à l’unanimité d’adopter une unité intermédiaire entre les deux extrêmes.

Si le rapport avait été exactement 1 : 50 : 2.500, il aurait été possible d’admettre ce rapport comme étant la commune mesure la plus commode. Toutefois, comme tel n ’est pas le cas, les membres de la Conférence de Genève ont reconnu que, pour arriver à ce rapport simple, les unités actuellement en usage devraient être modifiées.

A cet effet, le professeur K o l l e offrit de proposer à son gouvernement de modifier l’unité allemande de façon à ce que son rapport avec l’unité américaine fû t exactement de 1/50. Il pro­posait, en outre, de multiplier cette unité par 100, afin de l’adapter aux mensurations du sérum antidiphtérique, pour la plus grande commodité des médecins.

Si ces propositions sont adoptées, on aurait alors le rapport suivant :Unité américaine Nouvelle unité allemande Unité française

50 100 2.500Le professeur Louis M a r t in fait remarquer que, dès lors, le rapport entre l’unité améri­

caine et la nouvelle unité allemande serait de 1 à 2 ; il demande d’accepter l’unité américaine multipliée par deux, c’est-à-dire la nouvelle unité allemande comme unité internationale.

La Commission propose le titrage des sérums antitétaniques avec le sérum établi d’après les principes ci-dessus expliqués et acceptés.

La Conférence a donc ainsi adopté, en principe, une unité internationale. II ne reste plus qu ’à établir définitivement, au moyen d ’une série d ’expériences, les rapports exacts existant entre les différents sérums employés pour le titrage en antitoxine du sérum antitétanique.

La Conférence demande, en outre, que, seuls, soient acceptés les procédés se basant sur la neutralisation de la toxine par l’antitoxine tétanique.

L ’Institu t de sérothérapie de l’E ta t danois fera, pour les recherches nécessitées par ces propositions, fonctions de laboratoire central du Comité d’hygiène de la Société des Nations.

La décision de la Conférence de Genève implique la nécessité de poursuivre les expériences, en vue de définir avec précision le contenu des nouveaux étalons.

4. T1 s’ensuit donc que la Conférence de Genève a définitivement réglé la question de la standardisation du sérum antidiphtérique et qu’elle a adopté, en principe, une unité interna­tionale de sérum antitétanique.

LEAGUE OF NATIONS

SECOND INTERNATIONAL CONFERENCE ON THE STANDARDISATION OF SERA

AND SEROLOGICAL TESTS

convened by the Health Committee of the League of Nations and held at the Pasteur Institute

in Paris from November 20th to November 26th, 1922.

REPO RT.

1. — The Health Committee of the League of Nations, having recognised the great practical and international importance of the standardisation of sera and serological tests, decided, at its meeting in Paris in October 1921, on the proposal of its Chairman, Professor M a d s e n , to institute experimental researches on these problems and to entrust them to the following State laboratories and national institutes :

Research Work in which these Institutes and Laboratories already specialise.

Great Britain :

M e d i c a l R e s e a r c h Co u n c i l

France :

P a s t e u r I n s t i t u t e

Italy :

S t a t e I n s t i t u t e

Polan d :

S t a t e E p id e m io l o g ic a l I n s t i t u t e , W a r s a w .

Switzerland :

H y g i e n i c I n s t i t u t e , B a l e

B elg ium :

P a s t e u r I n s t i t u t e , B r u s s e l s

Japan :

K it a s a t o I n s t i t u t e

United States :

H y g i e n i c L a b o r a t o r y , W a s h in g t o n

R o c k e f e l l e r In s t i t u t e

Austria :

Germany :

In s t i t u t e o f E x p e r i m e n t a l P a t h o l o g y , F r a n k f o r t

Ca n c e r R e s e a r c h I n s t i t u t e , H e i d e l b e r g

R o b e r t K o c h In s t i t u t e , B e r l i n

Anti-dysentery serum, Anti-meningococcus serum, Sero-diagnosis of syphilis.

Anti-tetanic serum, Anti-diphtheritic serum, Anti-meningococcus serum, Anti-pneumococcus serum, Anti-dysentery serum.

Anti-tetanic serum.

Anti-dysentery serum, Sero-diagnosis of syphilis.

Anti-dysentery serum.

Sero-diagnosis of syphilis.

Anti-dysentery serum.

Anti-tetanic serum, Anti-diphtheritic serum. Anti-meningococcus serum, Anti-pneumococcus serum.

Sero-diagnosis of syphilis/

Anti-diphtheritic serum, Anti-tetanic serum, Sero-diagnosis of syphilis. Sero-diagnosis of syphilis.Anti-meningococcus serum, Anti-pneumococcus serum.

— 12 —

In order to discuss and establish a common programme of research, the Committee further decided to call a conference of representatives of the above-mentioned laboratories and in­stitutes. This Conference, which was held a t the Ministry of Health in London, from Decem­ber 12th to December 14th, 1921, constituted four Sub-Committees, which were entrusted respectively with the study of the following subjects :

(1) Anti-diphtheritic and anti-tetanic sera ;(2) Anti-meningococeus and anti-pneumococcus sera ;(3) Anti-dysentery serum ;(4) Sero-diagnosis of syphilis.

The resolutions adopted by the Sub-Committees defined the method to be followed in experimental researches to be undertaken forthwith and simultaneously by the various national institutes and State laboratories. I t was understood th a t the results would be centralised by the Danish Serotherapeutic State Institute.

It was further decided tha t the President should, if necessary, convene small meetings to discuss specific problems, and th a t a second Conference would be held a t the Pasteur Institute at Paris when sufficient progress had been made in the researches to allow of a comparison of the results obtained.

2. - At the fifth meeting of the fourth session of the Health Committee, held in Geneva, from August 14th to August 21st, 1922,1 Dr. Madsen stated th a t considerable progress had been made with the researches into the anti-tetanic and anti-diphtheritic sera, bu t th a t this was not the case as regards the other subjects under investigation, especially as regards the sero-diagnosis of syphilis, which required further experiments.

The Committee authorised its Chairman to convene any meeting of experts he might consi­der necessary, and to secure, if need be, the co-operation of any institute or specialist that he might desire to consult.

3. — The Sub-Committee on the anti-diphtheritic and anti-tetanic sera met a t Geneva, from September 25th to September 27th, in order to compare the results obtained from the study of these sera. The various institutes th a t had undertaken comparative research, on the invitation

' of the Health Committee, were represented by the following persons :

Chairman of the Health Committee : Professor Th. M a d s e n , Director of the Serotherapeutic State Institute, Copenhagen.

Chairman of the Sub-Committee on Anti-Diphtheritic and Anti-Tetanic Sera : Professor Louis M a r t i n , Deputy Director of the Pasteur Institute, Paris. :

Members : Professor B. Gosio, Director of the Bacteriological.Laboratory, Public HealthService, Rome.

Professor W. K o l l e , Director of the Institute of Experimental Pathology, Frank­fort.

Mr. G. W. M cCo y , Director of the Hygienic Laboratory, Washington.Professor M. M i y a j i m a , of the Kitasato Institute, Tokio.

Professor T a r a s s e v i t c h , representing the State Institute for the Control of Sera, a t Moscow, also attended the Conference.

After noting the results obtained from the experiments on anti-diphtheritic sera made at Frankfort by the Institute of Experimental Pathology, a t Paris by the Pasteur Institute, at Rome by the State Laboratory of Bacteriology, a t Washington by the Hygienic Laboratory, a t Copenhagen by the Serotherapeutic State Institute, the Sub-Committee agreed th a t the Ehrlich Unit should be finally adopted as an international standard for the titration of anti- diphtheritic sera. I t adopted a resolution inviting Dr. M a d s e n , who was entrusted with the work of centralising the researches, to arrange for a comparative study of these sera to be carried out every year.

W ith regard to the anti-tetanic serum, the Sub-Committee came to the conclusion :(a) That the comparative researches carried out in the Institutes of Copenhagen, Frank­

fort, Paris, Rome and Washington pointed to the adoption of the principle of a new interna­tional unit based on the American unit ; and

(b) That it was still necessary to establish definitely by a series of experiments the exact relationship between the different sera used for the measurement of the anti-toxic content of the anti-tetanic serum, and th a t for this purpose recourse should be had only to processes based on the neutralisation of the toxin by the tetanic anti-toxin (Annex).

4 .— The Chairman of the Health Committee, considering, from the results of the reports'-1 th a t had been sènt to him by the various institutes and laboratories, tha t the progress of the researches called for a meeting of representatives of the participating laboratories and institutes, in order to compare the results obtained, and to settle the details of the further researches to be carried out, convened for November 1922 a second International Health Conference on the Standardisation of Sera and Serological Tests. In accordance with the decision taken by the

1 Minutes of the Fourth Session of the Health Committee, page 28, Docum ent G. 555, M, 337- 1922. I ll ,8 These reports will be published separately,

first Conference and as a result of an invitation from the Pasteur Institute of Paris, the second Conference met a t th a t Institute. I t lasted from November 20th to November 26th, 1922.

The Conference opened on November 20th under the chairmanship of M. St r a u s s , the French Minister of Health. Professor Roux, Director of the Pasteur Institute, welcomed the delegates and expressed his pleasure a t seeing eminent scientists from three continents gathered together in the house of the great Pasteur. He expressed the hope th a t this international co-ope­ration would be fully successful and would serve as ain example in other fields than th a t of science.

Dr. M a d s e n thanked the Minister of Health for attending the first meeting of the Confe­rence. He expressed to Professor R oux his own gratitude and th a t of his colleagues, and he invited the members to rise in order to commemorate the great scientist, whose centenary was about to be celebrated.

M. S t r a u s s thanked Dr. M a d s e n for the tribute paid to the memory of Pasteur. He congratulated the delegates on the devotion with which they had carried on their researches, under the auspices of the League of Nations, in order to arrive a t a unity of method, the result of which would be most important, and he assure^, them th a t the Government of the French Republic was most interested in the success of their work.

Dr. M a d s e n then took the chair. He said he was very pleased to see a t the Conference all the scientists — with the exception of D r . D o u g l a s and Dr. G o r d o n , whose absence he regretted — who had, on the invitation of the Health Committee, undertaken researches, the programme of which had been outlined by them a t the London Conference.

He noted with satisfaction tha t the Office international d’hygiène publique, which had been represented a t London by the Chairman of its Committee, M. Velghe, had sent to the present Conference ts Deputy Director, Dr. P o t t e v i n , Senator, and Dr. A b t .

H e welcomed as members of t h e Conference Dr. M u t e r m i l c h and his colleagues of the Pasteur Institute, Professor B o r d e t of Brussels, Professor von W a s s e r m a n n and Professor N e u f e l d of Berlin, Dr. W a d s w o r t h , representative of the Rockefeller Institute a t New York, Professor H i d a , representative of the Kitasato Institute of Tokio, Professor T a r a s s e v i t c h , th e representative of the State Scientific Institute of Public Health a t Moscow, andProfesso • Ca n t a c u z è n e , Director of the Experimental and Medical Institute a t Bucarest.

He pointed out the difficulties with which the Conference would have to deal before arriving at practical results. The Conference, a t his suggestion, decided to constitute immediately the five following sub-committees : .

Sub-Committee on anti-diphtheritic and anti-tetanic sera ;Sub-Committee on the anti-meningococcus serum ;Sub-Committee on the anti-pneumococcus serum ;Sub-Committee on the anti-dysentery serum ;Sub-Committee on the sero-diagnosis of syphilis.

The Sub-Committees sat from Monday, November 20th, until Friday, November 24th.The Conference held a second plenary meeting on Saturday, November 25th, and adopted

the following resolutions, which had been drawn up by the various Sub-Committees.

ANTI-DIPHTHERITIC SERUM.

The Sub-Committee adopted the proposals contained in Dr. M a d s e n ’s report on the Geneva Conference (Annex 1).

The Sub-Committee decided that, as the Ehrlich unit had been adopted as the international unit, it would be very desirable to induce firms in all countries to supply phials containing uni­form quantities of anti-toxic units for preventive and therapeutic injections.

The Sub-Committee resolved that, in the first place, an enquiry should be made with a view to ascertaining what quantities of anti-toxic units are a t present contained in the phials offered for sale.

It was decided tha t the Health Committee of the League of Nations should ask the various institutes and firms for samples of phials and have a report on the enquiry prepared for a later session.

ANTI-TETANIC SERUM.

The Sub-Committee approved the Geneva Conference resolutions (Annex 1).I t modified the last paragraph of section 3 (tetanus) so as to read as follows :

“ The decision of the Geneva Conference implies the necessity of further experi­ments in order to define in details the technique to be used for the titration of anti- tetanic serum with the new standard. ”

ANTI-MENINGOCOCCUS SERUM.

In order to secure a more uniform international classification and nomenclature for menin­gococci, the Sub-Committee resolves :

I. That an interchange of meningococcus cultures and monovalent antimeningococcus sera be made between the different laboratories. Cultures representative of the different types will be selected by the different laboratories, and monovalent serum prepared in animals from each of these cultures.

II. That the classification of meningococci should be based as far as possible :(1) Upon a primary division into groups to be designated by numerals, for example: I, II

(according to the present type classification into types of Gordon) without prejudice to other groups which may be recognised later ;

(2) Upon a subdivision of the main groups into sub-groups or types to be designated by letters, together with the numeral of the main group under which they are to be classified, for example la, 116, etc.

The primary division into groups is to be based upon agglutination alone. The groups comprise cultures which are agglutinated similarly in high dilution of monovalent sera which are relatively free from heterologous agglutination.

The secondary division into types is to be based upon distinctive characters as determined by the results of both the agglutination and absorption tests with monovalent serum.

Cultures which cannot be accurately identified should be classed under group “ X. ”

For the study of the standardisation of therapeutic sera, the Sub-Committee further resolves :

(1) That à new series of tests shall be made with monovalent and polyvalent sera, to determine their comparative content in agglutinins, amboceptors, opsonins and anti-toxin. The serum used should be collected a t different intervals after the last injection. The serum must be obtained from the horse and must not be heated.

Precise information must be given regarding the method of preparation, the date of bleeding, the addition of antiseptics and, if possible, the therapeutic action of the same serum in human cases of meningitis.

So far as possible the same culture should be used for immunising the horses and for testing the serum.r J Only meningococci obtained from the eerebro-spinal fluid of cases of meningitis shall be used for this study. ' .

(2) That studies should be made of the effect of heat, especially tyndalisation (56 degrees Centigrade for one hour during three successive days), on the properties of the serum.

(3) That careful studies should be made of the immunological reactions with meningococci recently isolated from cases of meningitis in which the serum has not been effective.

(4) The exchange of cultures and sera should be made through the medium of the Central Institute at Copenhagen.

ANTI-PNEUMOCOCCUS SERUM.

I. The Sub-Committee regards the classification of pneumococci into different serological types as fundamental for all further researches on serotherapy, vaccination and epidemiology, and accepts the three chief types I, H and III, defined by the workers of the Rockefeller Institute, as standard types for international research. Strains not conforming to any of the above three types should be classified provisionally in a group “ X. ”

As pneumococci in certain circumstances may undergo changes in their immunological characters, the classification of the types for epidemiological purposes should be based upon the agglutination reactions with freshly isolated strains, or preferably upon the results of the test with the peritoneal exudate of a mouse injected with sputum or other material taken directly from the patient.

II. W ith regard to the distribution of the types of pneumococci in different parts of the world, the Sub-Committee expresses the wish that, in addition to further researches in E u r o p e and the United States, investigations along the same lines should be undertaken in tropical and other countries where the climatic and social conditions differ widely.

In the first place, cases of lobar pneumonia should be studied, but observations on other forms of pneumococcal infection should also be recorded.

15 —

III. A study of the therapeutic action in the treatm ent of early cases of pneumonia should be made with anti-pneumococcus serum which has been carefully titrated and found to be highly protective for mice. The investigation should be made only in institutions fully equipped for such a purpose.

IV. W ithout expressing an opinion in regard to the therapeutic value of the serum in the t r e a tm e n t of pneumonia, the Sub-Committee regards the titration test in the mouse, when contro lled by a standard serum, as a basis for an international standardisation of the serum.

Therapeutic- serum may be titrated in mice either by injecting intraperitoneally a fixed quantity (0.2 c.c.) of serum mixed with a highly virulent broth culture in doses ranging from0.1 c.c. to 0.4 c.c. or more; or by injecting smaller and varying quantities (0.001 or 0.0001 c.c.) of serum intraperitoneally, and three hours later a moderate dose of culture, for example, 0.0001 c.c. The virulence of the culture should be such as to kill mice in doses of at least 0.000,0001 c.c. within forty-eight hours. For every titration a standard serum must be used.

V. Further research should be made into the mechanism of recovery from pneumonia and into the mode of action of anti-pneumococcus serum.

VI. A study of anti-streptococcus serum is desirable.VII. Standard cultures, agglutinating and standard therapeutic sera to be supplied by

the Central Institute of Copenhagen.

ANTI-DYSENTERY SERUM.

The Sub-Committee resolves tha t :

(1) I t is necessary to test further and to determine the choice of the animal to be used for standardisation of anti-dysentery serum. These tests should be carried out comparatively on rabbits of 1,500 to 1,600 grams weight and on white mice of 15 to 16 grams weight.

(2) The substances compared will be liquid toxin, solid toxin (Wellcome) and microbes killed by heat.

(a) Liquid toxin will be prepared by each laboratory with a culture of toxic Shigawhich will be supplied by the Pasteur Institute (the filtrate of a twenty-days-old cultureon peptone broth (Chapotaut’s peptone) sown in litre flasks containing 500 c.c. of liquidwith an alcalinity P H 7.4).

(b) The solid English toxin will be supplied by the Wellcome Laboratories.

(c) The microbes killed by heating a t 56° C. for one hour and dried in vacuum will be supplied by the Pasteur Institute (agar culture emulsified in physiological salt solution).

The effect of subcutaneous, intraperitoneal and intraveinous injections w.ill be compared.

(3) There is no need, in the tests, to discriminate between the anti-n euro toxic and the anti-enterotoxic power of the serum.

(4) The titration of sera will be carried out by a mixture of toxin and serum, after 30 minutes, contact a t laboratory temperature.

(5) There is no need to try to give the serum an anti-infectious power as distinct from its antitoxic power.

(6) I t would be of interest to test on man the power of monovalent (anti-Flexner, anti- His, etc.) sera against homologous strains of dysenteric organisms.

SERO-DIAGNOSTIC OF SYPHILIS.

The Sub-Committee sat from November 20th to November 25th, 1922,On November 20th, the reports were presented of the nine laboratories which had been

entrusted with the comparative study of the Bonlet-Wassermann. Sacbs-Georgi, Meinicke and Sigma reactions. - •

On November 21st, a summary of these reports was presented by the Secretaries.

A discussion followed and various proposals were made by Professors D r e y e r , K o l l e Sachs , and N e u f e l d .

On November 22nd, Dr. V e r n e s demonstrated the technique of his test and explained its advantages.

Dr. M u t e r m i l c h summarised the results of his work in the Pasteur Institute with t h e Bauer- Hoçht-Weinberg method, and made proposals.

On November 23rd, Professor M a d s e n presented draft resolutions t o t h e Sub-CommitteeAs result of the discussion on these proposals, a Sub-Committee of the representatives of

the laboratories which had taken part in the research was formed, with a view to deciding the technical details of the Sachs-Georgi and Sigma tests.

On November 24th, Professor Madsen’s proposals were adopted and it was decided that these should form the basis of the final resolution.

The Sub-Committee decided upon the laboratories which were to undertake the compa­rative tests named in paragraph 2 of these resolutions (see below).

On November 25th, the following resolutions were adopted :(1) The comparison of the four tests shall be continued as follows :

(a) The technique of the Bordet-Wassermann test carried out in the laboratories taking part in the research shall be th a t which has been hitherto employed by them.

(b) The Sachs-Georgi test shall be carried out in the same number of tubes as hitherto, but two quantities of sera and one extract will be used, as determined by the special Sub-Committee on Technical Details.

(c) For the purposes of this comparison the quantitative titre of the reaction obtained by the Sigma test shall be omitted. Only qualitative results will be considered.

(cf) The following laboratories shall be invited to make further studies as to the Memicke test, in consultation with Dr. Meinicke :

Heidelberg (Prof. S a c h s ) .Vienna (Prof. M ü l l e r ).Copenhagen (Prof. M a d s e n ).

(e) The laboratories taking part in the whole research shall be invited to study comparatively the influence of the various factors in the tests, particularly variations in the antigon.

(/) I t is understood tha t the research will be carried out on 500 cases in which syphilis has as far as possible been excluded and on 500 cases of syphilis. As many aspossible of these cases should be in the early primary, in the latent or in the tertiarystages of syphilis.

(2) The State Serum Institute of Copenhagen will endeavour to collect 500 specimens of syphilitic serum and 500 of non-syphilitic. These specimens will each be divided into five equal portions, one of which wrill be sent to each of the following laboratories :

In Austria, Prof. M ü l l e r ,» Belgium, Prof. B o r d e t ,» Germany, Prof. von W a s s e r m a n n ,» Great Britain, Dr. H a r r is o n , *» Poland, Prof. H i r s z f e l d ,

so a s to compare the results obtained by each of these laboratories, employing theirnormal technique for the Bordet-Wassermann test.

REPORT OF THE SUB-COMMITTEE ON TECHNICAL DETAILS.

I. S a c h s - G e o r g i T e s t .

The serum, after inactivation, is to be diluted to 1 in 5 with 0.85 percent, salt solution. Of this dilution place :

In No. 1 tube, 1.0 c.c.In No. 2 tube, 0.5 c.c.

Add to No. 2 tube 0.5 c.c. physiological salt solution. In No. 3 tube, 1.0 c.c.One extract will be used. This will be supplied by Prof. Sachs.

Dilution of extract. —- If the interval of 30 seconds between the addition of the first and second quantities of saline results in flocculation of the diluted extract, it may be shortened sufficiently to prevent this occurrence.

Incubation to be for 20 to 24 hours a t 37° C. in the air incubator.

II. S ig m a T e s t .

(a) Five tubes will be used. In the event of the amount of serum being insufficient, th e first tube may be omitted. If then the result is positive it may be recorded; if it is n e g a tiv e , it must be omitted from the series.

— 17 —

(6) The extract shall be th a t supplied by Professor Dreyer and shall be diluted precisely ,IS d ire c te d in the description of the method published by Dreyer & Ward.

(c) Incubation. During the incubation, i t is imperative tha t the tubes shall be immersed in such a manner th a t no less than half and no more than three-quarters of the column of fluid in ach tube is below the level of water in the water bath. Incubation is to proceed for a t least 9 0 to 22 hours, and in the case of doubtful reaction to be prolonged to 40 to 44 hours.

S ig m a .

Serum Control. If the amount of serum permits, a control containing :Serum, 10 drops;Alcohol, 3 %, 15 drops in saline,

may be used.If a sufficient amount of flocculation occurs in this control to v itiate the test in the opinion

of the serologist, the result will nevertheless be returned, but with a note stating th a t the control showed flocculation and the am ount of flocculation.

Whenever a control is used, the reading of the control tube will be reported.

III. R e c o r d i n g o f R e s u l t s .

Exact directions will be circulated from Oxford and from Heidelberg as to the readings which are to be regarded as positive and negative respectively. •

IV.

It is desirable to study the influence of the several factors named below :(1) Comparison between the extracts of Sachs and Dreyer-Ward in the two methods.(2) Influence of the method of diluting the extracts in the two methods.(3) Comparison between the use of the thermostat and the water-bath for incubation.(4) Comparison of the effect of inactivation of the serum for different periods (half-an-

hour and one hour and a-half).(5) Comparison between the use of narrow tubes (Dreyer) and of ordinary tubes (Sachs-

Georgi).(6) Comparison of the results obtained by reading of the tests by the two methods after

20 to 24 hours and 40 to 48 hours respectively.(7) Study of the relative quantities of serum and extract to be employed.(8) Comparison of the use of pipettes and drops for measurement.

C. H. 41.

Annex 1

R EPO RT BY PROFESSOR Th. M A DSEN

ON T H E

SEROLOGICAL CONFERENCE

HELD AT GENEVA, SEPTEMBER 25th-27th, 1922

(1) I t will be remembered that, a t the Fourth Session of the Health Committee, it was reported tha t considerable advance had been achieved in respect of the anti-tetanic and the anti-diphtheritic sera, and tha t a conference of international experts to compare results would be held in September. The Health Committee authorised the Chairman to convene any small technical conference, which he might judge to be necessary. The Conference met in Geneva from the 25th to the 27th September.

The following Institutes engaged in these experiments were represented by :Chairman oi the Health Committee : Professor Th. M a d s e n , Director of the Danish State

Serum Institute, Copenhagen,Chairman of the Sub-Committee of Anti-Diphtheritic and Anti-Tetanic Sera : Professor

Louis M a r t i n , Deputy Director of the Pasteur Institute, Paris.Members : Professor B. Gosio, Director of the Bacteriological Laboratory of Public Health

Service, Rome.Professor W. K o l l e , Director of the Institute of Experimental Pathology, Frankfort.Mr. G. W. McCoy, Director of the Hygienic Laboratory, Washington.Professor M . M iy a j i m a , of the Kitasato Institute for Infectious Diseases, Tokio.

Professor T a r a s s e v it c h , representing the State Serum Control Institute, Moscow, also attended the Conference.

(2) Diphtheria Anii-ioxin, — It will be remembered tha t the special Sub-Committee which considered this subject a t the International Conference on the Standardisation of Sera and Serological Tests, held in London in December 1921, adopted the following resolution concerning diphtheria :

“ Two units are used a t present.“ Between these two units, — namely, the unit of Ehrlicli, preserved a t the Frankfort

Institute, and the American unit, as supplied by the Washington Bureau — according to the experiments carried out to date, there are only very small differences. To determine these differences accurately, the standard sera and test toxins for the necessary researches will be given to the various participating institutes by the Frankfort Institute for Experimental Pathology and the Washington Public Health Bureau.

“ The result of the experiments performed with the sera and toxins a t the several labora­tories represented will be delivered to the Danish Serum Institute, which for this purpose will act as the central laboratory of the Health Committee of the League of Nations. ”

Experiments wTere started immediately by the Institute for Experimental Pathology' Frankfort; the Pasteur Institute of Paris; the State Bacteriological Laboratory of Rome; the Hygienic Laboratory, Washington ; and the Danish State Serum Institute. The above institutes had compared the Ehrlich unit, which is kept by the Frankfort Institute, and the anti-toxic unit, which is kept by the Washington Bureau, and they have demonstrated th a t the difference between these two units is almost inappreciable.

From the results obtained, it is evident tha t the Ehrlich standard unit should be finally considered as the international standard for the measurement of the diphtheria anti-toxin.

The Gene va Conference resolved tha t :“ In order to ensure tha t the sera used as standards by the various States have identica*

titre, it would be well if Professor Madsen, acting as Director of the Serotherapeutic State Institute of Denmark, which institute has been designed to act for this purpose as a central laboratory for the Health Committee of the League of Nations, should a r r a n g e for compara­tive studies of such sera to be carried out every year

The records of the tests carried out by the various institutes are ready for publication and will be issued together with the experiments on the standards of the tetanus anti-toxin.

In order to carry out the results of the Geneva Conference, the Danish State Serum Institute will receive periodically specimens of the standard anti-toxn for the comparative tests. It is

— 19 —

obvious tha t any State Institute oil application lo Copenhagen will be able to receive an authen­tic sample of the standard.

The Danish State Serum Institute will examine the sera used as standards by the various States at least once aryear. Should any variations be detected, it will b e suggested to the in­stitute concerned th a t comparative tests be carried out. It is further understood tha t any institute will be free to send to Copenhagen samples of its standard serum a t any time w ith/the request th a t they should be tested against the international standard.

(3) Tetanus. — The International Serological Conference held in London adopted the following resolution concerning tetanus :

“ Four methods a t present are employed to describe the potency of anti-tetanic toxin.“ These four methods start from different points of departure and experiments have not

vet determined the exact relation between the units determined by each of these methods.“ The Sub-Committee considers, however, tha t it is desirable and possible to establish a

common measure by an agreement on a single standard antitoxin, using the principle which has been adopted in connection with the standardisation of anti-diphtheritic serum.

“ In the first instance, the participating laboratories m ust fix experimentally the relations which obtain between the four units a t present employed.

“ W ith this object, an exchange of sera and toxins will be made in order to secure the necessary comparative experiments.

“ The details of the experiments made with each method will in all cases be de­scribed in precise detail.

“ All the relative documents will be sent to the Danish State Serum Institute, which for this purpose will act as the central laboratory of the Health Committee of the League of Nations, and the results will be discussed a t a subsequent conference.”

Comparative experiments have been carried out during the last nine months by the institutes at Copenhagen, Frankfort, Paris, Rome and Washington.

Although the experiments have not been carried to the final stage, sufficient progress has been made to enable an understanding to be reached as regards the basis of an international agreement.

A comparison of the results of the tests shows tha t the ratio between the different sera is approximately as follows :

Taking the German serum as being 1 titre, the American would be 60 to 66 titre and the French in the neighbourhood of 2,500 titre.

All the members of the Geneva Conference decided that a unit should be adopted which would be intermediate of the two extremes.

Had the ratio been exactly 1 : 50 : 2,500, it would have been possible to accept i t a t once as'the most convenient common measurement. As, however, this is not the case, it was obvious to the members of the Geneva Conference that, in order to attain this simple proportion, the units used at present would have "to be re-adapted.

In order to attain this, Professor Kolle has offered to propose to his Government tha t the German unit should be so adapted th a t its relation to the American unit should be exactly 1 : 50. Moreover, he declared his intention of proposing th a t this newly established unit should be mul­tiplied by 100 in order to make it conform to the measurement of the diphtheria anti-toxin so as to meet the convenience of the medical practitioners.

If this be accepted, then the following ratio would obtain :American unit. New German unit. French unit.

50 100 2,500

Professor Louis M a r t i n observed that, under these conditions, the ratio between the American and the new German unit would be 1 to 2 and he therefore moved th a t the American unit multiplied by two, or in other words the new German unit, be accepted as the international standard.

The Sub-Committee proposed th a t the anti-tetanic sera be titrated against the standary established in accordance with the accepted principles as set out above.

Thus the. Conference has adopted in principle an international unit. There remains odln the necessity of establishing definitely by a series of tests the exact relationship between the several sera used for the measurement of the anti-toxic content of the anti-tetanic serum.

The Conference, moreover, asked tha t only procedure based on the neutralisation of toxin by tetanic antitoxin should be accepted.

The Danish State Serotherapeutic Institute will act as the central laboratory for the Health Committee of the League of Nations for the research necessitated by this proposal.

The decision of the Geneva Conference implies the necessity of further experiments in order to define with precision the actual strength of the new standards.

(4) I t follows therefore tha t the Geneva Conference has finally settled the question of the standard of the diphtheria anti-toxin and has adopted in principle an international unit for the tetanus serum.

A NL A G E 2

AUTHENTISCHER TEXT DER BESCHLÜSSE IN DEUTSCH

von der K onferen% genehm igt.

ANNEXE 2

TEXTE AUTHENTIQUE DES RESOLUTIONS EN ALLEMAND

approuvé p ar la Conférence.

ANNEX 2

AUTHENTIC TEXT OF THE RESOLUTIONS IN GERMAN

as approved by the Conference.

B E S C H L U S S E .

DIPHTHERIE-SERUM .

Die Kommission verweist auf den Bericht von Dr. Madsen über die Konferenz in Genf (Beilage 3) und nimmt die darin enthaltenen Vorschlæge an.

Nachdem die von Ehrlich festgesetzte Diphtherie-Immunitætseinheit als internationale Einheit angenommen ist., wære es von Bedeutung dahin zu gelangen, dass in allen Lændern von den Serumfabriken Flæschchen m it dem gleichen Gehalt von Immunitætseinheiten fiir Schütz und Heilzvt ecke abgegeben würden.

Es wird beschlossen, zunæchst eine Enquête darüber anzustellen, welche Dosierungen der Immunitætseinheiten augenblieklich von den Fabriken in den Handel gebracht wrerden. Das Hygiene Comité des Vœlkerbundes wird die verschiedenen Institute sowie Fabriken, die Diph- therie-Serum abgeben, um diese Angaben bitten und wird die Ergebnisse dieser Rundfrage auf einer spæteren Konferenz mitteilen.

TETANUS-SERUM.

Die Vorschlæge der Genfer Konferenz (Beilage 1) wurden aufrechterhalten.Die Forderung des letzten Absatzes (Abschnitt 3) Tetanus wird in folgender Weise vorge-

schlagen :

„ Die Beschliisse der Genfer Konferenz machen weitere Versuche notwendig, um die technischen Einzelheiten der Wertbestimmung m it Hilfe des neuen Tetanus Standardserums auszuarbeiten

ANTI-MENINGOKOKKEN-SERUM.

1. Um eine einheitliche internationale Bestimmung und Benennung der Meningokokken zu sichern, beschliesst der Unterausschuss, dass Meningokokken Kulturen und monovalente anti- meningokokken-Sera zwischen den verschiedenen Laboratorien ausgetauscht werden sollen. Test Kulturen der verschiedenen Typen sollen vor den verschiedenen Laboratorien ausgewæhlt und ein monovalentes Serum durch Behandlung von Tieren mit diesen Stæmmen hergestellt werden.

2. Die Meningokokken sollen soweit als mœglich zunæchst in Gruppen, welche durch Nummer I, II... (nach der gegenwærtigcn Klassifikation von Gordon) eingestellt werden ; diese Hauptgruppen sollen weiter in Untergruppen oder Typen zerfalien, die durch Buchstaben bezeichnet werden denen die Nummer der betrefîenden Hauptgruppe beigeführt wird, also zum Beispiel la, IIZ>....

Die Hauptgruppen werden ausschliesslich auf Grand der Agglutination bestimmt : sie umfassen diejenigen Kulturen welche gleichmæssig durch hohe Verdünnungen dnes monova- lenten, hochwertigen Serums wenig heterologe Agglutinine enthaltenden Serums agglutiniert werden.

Die Einteilung in Untergruppen griindet sich auf die Ergebnisse der Agglutination und der Absorption m it monovalent en Sera.

Stæmmc welche nicht sicher identifiziert werden kœnnen sind in eine Gruppe einzureihen.

3. Eine Reihe von monovalenten und polyvalenten Sera sind vergleichend zu untersuchen auf ihren Gehalt an Agglutininen, Amboseptoren, Opsoninen und Antitoxinen. Dabei sollen Pferdesera benutzt werden, die zu verschiedenen Zeiten nach letzter Einspritzung entnommen und nicht erhitzt sind.

Genaue Angaben sind zu machen liber die A rt der Herstellung des Serums, das Datum der Blutentnahme, den Gehalt an einem Antiseptikum und wenn irgend mœglich über die Heil- wirkung des betreffenden Serums beim Menschen.

Gründsætzlich sind dabei dieselben Stæmme zu benutzen die zur Immunisierung der Pferde gedient haben.

Es sind ausschliesslich Stæmme aus Lumbal-Fliissigkeit zu benutzen.

4. Der Einfluss der Erhitzung und besonderes der Tyndalisation (3 Tage lang tæglich eine Stunde auf 56°) auf die Wirkung des Serums ist zu untersuchen.

5. Besonderes sorgfæltig sollte die Immunitætsreaktionen an frisch isolierten Meningo­kokken von solchen Krankheitsfællen studiert werden, bei denen das Serum sich als unwirksam erwiesen hat.

6. Der Austausch von Kulturen und Sera geschieht entweder direkt oder durch Vermittlung des Zentralinstituts in Kopenhagen.

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PNEUMOKOKKEN-SERUM.

1. Der Unterausschuss sieht die Einteilung der Pneumokokken inTserologisch verschiedene Typen als grundlegend an für aile weiteren Untersuchungen liber Serumtherapie, Schütz impfung und Epidemiologie und nimmt die Typen I, II, III des Rockefeller-Instituts an Diejenigen Stæmme, die keinem dieser drei Typen entsprechen, sind vorlæufig in eine Gruppe « X » einzureiben.

Da die Pneumokokken unter gewissen Bedingungen serologische Verænderungen erleiden, soil zwecks Bestimmung der Typen für epidemiologische Zwecke die Agglutination mit frisch gezüchteten Kulturen oder besser mit dem Peritonealexsudat einer Maus ausgeführt werden, die mit Auswiirf oder anderem unmittelbar von dem Patienten stammenden Material injiziert worden ist.

2. Betrelïs der Verteilung der Typen in den verschiedenen Lændern empfiehlt der Unter­ausschuss, nicht nur weitere Fælle in Europa und in den Vereinigten Staaten zu untersuchen, sondern auch in tropischen und anderen Lændern, wo wesentlich verschiedenen klimatische und soziale Bedingungen vorliegen.

Vor allem sollen dabei Lobærpneumonieen, daneben aber auch andere Pneumokokkeii- krankheiten untersucht werden.

3. Die Heilwirkung eines hochwertigen und sorgfæl tigtitrierten Pneumokokken serums bei Fællen beginnender Pneumonie sollte in einem oder in mehreren Instituten, die aile nœtigen Einrichtungen dazu haben, sorgfæltig studiert werden.

4. Ohne ein Urteil über den Heilwert des Serums bei Pneumonie abzugeben, sieht der Unterausschuss die Feststellung des Schutzwertes an Mæusen im Vergleich mit einem Standard- serum als geeignete Grundlage für ein international gültiges Prüfungsverfahren an.

Heilsera kœnnen an Mæusen geprüft werden, in dem man entweder eine gleichbleibende Menge (0.2 cc.) Serum gemischt mit 0.1 bis 0.4 und mehr hochvirulenterBouillonkultur intra- peritoneal einspritzt, oder indem man kleinere, abgestufte Serummengen (0.001-0.0001) und drei Stunden spæter eine mæssige Menge Kultur, z. B, 0.0001 cc., beides intraperitoneal, inji­ziert. Die K ultur soil so virulent sein, dass mindestens 0.000.000,1 eine Maus in 48 Stunden tœ tet. Bei jeder Serumpriifung muss ein Standardserum mitbenutzt werden.

5. Die Art der Wirkung des Antipneumokokkenserums bedarf ebenso wie der Hergang der natürlichen Heilung der Pneumonie der Aufklærung durch weitere Beobachtungen.

6. Weitere U ntersu chungen über Antistreptokokkenserum sind erwünscht.

7. Das Zentralinstitut in Kopenhagen wird Testkulturen, diagnostische und Standard- sera zur Priifung von Heilsera abgehen.

DYSENTERIE-SERUM.

Die Unter-Kommission hat beschlossen :

1. Die Untersuchungen über das zur Wertbestimmung des Dysenterieserums geeignete Versuchstier sollen fortgesetzt werden. Zu den vergleichenden Prüfungen sollen Kaninchen von 1500-1600 g. und weisse Mæuse von 15-16 g. benutzt werden.

2. Es sollen flüssige Toxine, feste Toxine (Wellcome) und durch Hitze abgetœtete Bakte- rien vergleichend geprüft werden.

a) Das flüssige Toxin wird von jedem Laboratorium mit einer toxischen Shiga-Kultur bereitet wTerden, die vom Institut Pasteur geliefert werden wird (Filtrat einer 20-tægigen Kultur auf Pepton-Bouillon (Pepton Chapetaut) in Literflasche, die 500 cc. Flüssigkeit enthalten, mit einer Alkalescenz von P.H. 7,4).

b) Das feste englische Toxin wird von den Wellcome-Laboratorien geliefert werden.c) Die durch 1-stündiges Erhitzen auf 56° abgetceteten und im Vacuum getrockneten

Bakterien werden vom Institut Pasteur geliefert werden (Agarkultur-Abscbwemmungen in physiologischer Kochsalzlcesung). Die Injektionen sind vergleichend subcutan, in t ra p e r i to n e a l und intravenœs auszuführen.

3 . Es ist nicht nœtig, in den Untersuchungen die antineurotoxische und a n t ie n to ro to x is c h e Wirkung zu unterscheiden.

4. Die Wertbemessung des Serums soil m it Gemischen von Toxin und Antitoxin erfolgen die 1 /2 Stunde bei Zimmertemperatur gestanden haben.

5. Es ist nicht nœtig, neben der antitoxischen eine antiinfectiœse Wirkung fes tz u s te lle n .

6. Es wird von Interesse sein, beim Menschen monovalente Sera (anti-Flexner, anti- His, u. s. w.) gegenüber Dysenterie homologer Art zu erproben.

— 23

SERODIAGNOSîS DER SYPHILIS.

Die Unterkommission hat vom 20. bis 25. November getagt. Am 20. wurden die Bench te der neun Laboratorien vorgelegt, die m it vergleichenden Untersuchungen iiber die Methode von Bordet-Wassermann, Sachs-Georgi, Meinicke und Sigma betraut waren.

Am 21. hatten die Sekretære der Unterkommission ein Re(u n é aller Berichte vorgelegt. Es folgte eine Diskussion und verschiedene Vorschlæge wurden gemacht von

Prof. D r e y e r ,» K o l l e ,» S a c h s ,» N e u f e l d .

Am 22. November hat Dr. Vernes die Technik seiner Methode demonstriert und ihre Vor- teile hervorgehoben.

Dr. Mutermilch hat die Ergebnisse des Institut Pasteur mit der Methode Bauer-Hecht- Weinberg mitgeteilt ; ausserdem machte er einige Vorschlæge.

Am 23. ha t Prof. Madsen der Kommission Vorschlæge für die endgiiltige Resolution gemacht. Am Mittag wurde eine Unterkommission der Vertreter der Laboratorien gebildet, die an

den Untersuchungen teilnehmen um die Technik der Sachs-Georgi-Reaktion und der Sigma- Reaktion zu bestimmen.

Am 24. wurden die Vorschlæge von Prof. Madsen angenommen, und es wurde beschlossen, dass sie als Basis für endgültige Resolutionen dienen würden.

Es wurden Laboratorien bestimmt, um die in ZifTer 2 der Resolution genannten' verglei­chenden Prüfungen auszuführen. (S. weiter unten.)

Am 25. wurden die folgenden Resolutionen angenommen :

1. Der Vergleich der vier Methoden wird unter folgenden Bedingungen fortgeführt :a) Die Technik der Bordet-Wassermann-Reaktion wird in den einzelnen Labora­

torien wie bisher ausgeführt ;b) Die Sachs-Georgi-Reaktion wird mit zwei Serumdosen ausgeführt unter Ver-

wendung eines Extraktes entsprechend den von der Unterkommission angenommenen technischen Details ;

c) Bei der Sigma-Reaktion wird von der quantitativen Titration abgesehen. Nur qualitative Ergebnisse sollen beriicksichtigt werden ;

d) Die Meinicke-Reaktion wird von folgenden Laboratorien in Verbindung mit Dr Meinicke ausgeführt werden :

Heidelberg (Prof. Sachs),Wien (Prof. Müller),Kopenhagen (Prof. Madsen).

e) Die Laboratorien, die an den Gesamtuntersuchungen teilnehmen, sollen den Einfluss verschiedener Faktoren auf die Methoden (Sachs-Georgi- und Sigma-Reak- tionen) studieren, besonderes in Hinblick auf die Extraktfrage.

/) Die Untersuchungen sollen sich auf 500 Fælle von Syphilis und auf 500 Fælle von Nicht-Syphilis erstrecken. Die Syphilis-Fælle werden soweit wie mœglich das Primær- und Tertiærstadium, die Latenz und behandelte Fælle betreffen.

2. Das Seruminstitut in Kopenhagen wird mœglichst 500 Serumproben von Syphiliti- schen und 500 Serumproben von Nichtsyphilitischen entnehmen. Diese Proben werden in fünf gleiche Teile geteilt und gesandt an die Instituten :

Prof. von W a s s e r m a n n (Deutschland),» M ü l l e r (Oesterreich),

Dr. H a r r is o n (England),Prof. B o r d e t (Belgien),

» H ir s z f e l d (Polen).

Dadurch soli ein Vergleich der Ergebnisse angestrebt werden, die jedes Laboratorium mit spiner üblichen Methode der Bordet-Wassermann-Reaktion erhælt.

Der Bericht der Unterkommission

1. Die S a c h s -G e o r g i- R e a k t i o n wird folgenderweise ausgeführt :

Das inaktivierte Serum wird fünffach mit 0.85 % Kochsalzlœsung verdiinnt. Von dieser Verdünnung kommt :

In Rœhrchen 1 : 1.0 cc.» » 2 : 0.5 cc.» » 3 : 1.0 cc.

In Rœhrchen 2 wird 0.5 cc. 0.85 % Kochsalz zugefügt.Ausserdem wird zu den Rœhrchen 1 und 2, je 0.5 cc. der Extraktverdünnung und zu

Rœhrchen 3 : 0.5 cc. der entsprechenden Alkoholverdünnung zugefügt.

— 24 —

Extraktverdünnung. — Wenn bei einem Intervall von 307 zxvischen der Einf üllung derbeiden Quantitæten der Kochsalzlœsung Eigenflockung eintreten sollte, so kann das Intervall abge- kürzt werden.

Aufenthalt der Versuchsrœhrchen. — 20-24 Stunden im Brutschrank in 37° C.

2. S ig m a - R e a k t i o n .

a) Fünf Rœhrchen werden benutzt. Bei ungeniigender Serummenge kann das erste Rrehr- chen ausgelassen werden. 1st das Ergebnis in diesem a lie negativ, so ist es nicht zu v erw erte n .

b) Das E x trak t soil genau nach der Vorschrift von Dreyer und Ward verdünnt w erden.

c) In das Wasserbad sollen die Rœhrchen so gestellt werden, dass mindestens 1 /2 und hœchstens 3/4 der Flüssigkeitshœhe im Wasser ist. Der Aufenthalt im Wasserbad soil mindes­tens 20-24 Stunden dauern und bei zweifelhafter Reaktion auf 40-48 Stunden ausgedehnt werden.

Wenn es~die Serummenge erlaubt, soli eine Kontrolle angewendet werden enthaltend :10 Tropfen Serum,15 » 3 ° /0 Alkohol (in Kochsalzlœsung).

T ritt in diesen Kontrollrcehrchen Flockung ein, so wird das Ergebnis vermerkt, aber mit einer Bemerkung, dass in der Kontrolle Flockung vorhanden ist und welches Grades diese ist.

3. Die Laboratorien in Oxford und Heidelberg werden die Richtlinien mitteilen, nach denen das Ergebnis als positiv oder negativ beurteilt werden will.

Die verschiedenen Faktoren, deren Einfluss vergleichend geprüft werden soli sind folgende :1. Vergleich der Extrakte von Dreyer und Sachs bei beiden Methoden.2. Einfluss der Extraktenverdünnung bei beiden Methoden.3. Vergleich des Aufenthalts im Brutschrank und im Wasserbad.4. Vergleich der Inaktivierungszeit (1 /2 und 1 1 /2).5. Vergleich der engen Rœhrchen (Dreyer-Ward) und der gewœhnlichen Rœhren (Sachs-

Georgi).6. Vergleich der Ablesung der Ergebnisse nach 20-24 Stunden und nach 40-48 Stunden

bei beiden Methoden.7. Studien iiber quantitative Verhæltnisse.8. Vergleich der Abmessung mittels Messpipette und mittels Tropfen.

BEILAGE

Bericht von Dr. MADSENÜBER DIE

Serologisehe Konferenz

gehalten in Genf, vom 25. bis 27. September 1922.

1, In seiner vierten Sitzung hat das Hygiene Comité die bedeutenden Fortschritte im Stu- diuni des antitetanischen und des Diphtherie-Heilserums verzeichnet und kündigte an, dass eine internationale Konferenz von Sachverstændigen im September stattfmden wiirde, um die in dieser Richtung erzielten Ergebnisse zu vergleichen. Das Hygiene Comité hat den Præsidenten ermæchtigt, falls er es für angezeigt hielte, einige Gelehrte zu einer Konferenz zu berufen. Diese hat nun in Genf vom 25. bis 27. September stattgefunden.

Die verschiedenen in dieser Forschung' spezialisierten Institute waren folgendermassen vertreten :

Præsident des Hygiene Comités : Professor T h . M a d s e n , Direktor des Dæni- schen Staatl. Sero-therapeutischen Instituts Kopenhagen.

Præsident der Unterausschuss für antitetanisches und für Diphtherie-Heil- serum : Professor Louis M a r t i n , zweiter Direktor des Institut Pasteur, Paris.

Mitglieder : Professor B. Gosio, Leiter des Laboratoriums für Bakteriologie, Allgemeine Direktion des Gesundheitsamtes in Rom.

Professor W. K o l l e , Direktor des Institutes fur Experimentelle Pathologie, Frankfurt a /Main.

M . G. W. M c C o y , Direktor des Laboratoriums für Hygiene, Washington.Professor M, M i y a j i m a , vom Kitasato Institut für ansteckende Krankheiten,

Tokio.Professor T a r a s s e v it c h , als Delegierter des Staatlichen Institutes für Serum-kontrolle

in Moskau, nahm an der Konferenz Teil.

2. Diphtherie-Heilserum, — Der Unterausschuss, die in der internationalen Konferenz liber Standardisierung der Seren und der serologischen Reaktionen, gehalten in London im Dezember 1921, diese Frage bearbeitet hatte, hatte folgenden Beschluss betreffs Diphtheric gefasst :

« Es werden augenblicklich zwei Masseinheiten benutzt. Zwisclien beiden bestehen, nach den bisher ausgeführten Untersuchungen, nur sehr geringe Unterschiede.

« Zur genauen Festsetzung der Difïerenzen zwischen beiden Einheiten werden verschiedenen Instituten von dem Frankfurter Institut für Experimentelle Therapie sowie vom Bureau in Washington die noetigen Standard-Sera und Test-Gifte zu liefern sein.

« Die Resultate der m it diesen Sera und Toxinen ausgeführten Untersuchungen werden dem Staats Serum-Institut zu Kopenhagen, das fiir diese Untersuchungen als Zentrallaboratorium des Vœlkerbundes dient, iibermittelt. »

Es wurden sofort Untersuchungen vorgenommen. Dies geschali in Frankfurt durch das Institut für Experimentelle Pathologie, in Paris durch das Institut Pasteur, in Rom durch das Laboratorium für Bakteriologie, in Washington durch das Laboratorium für Hygiene, und in Dænemark durch das Staatliche Serotherapeutische Institut. Diese Institute haben die Ehrlich’sche Einheit, die das Frankfurter Institut aufbewahrt, mit der antitoxischen Einheit vom Washingtoner Bureau verglichen, und kamen zu dem Résultat, dass kein nennenswerter Unterschied zwischen diesen beiden Einheiten existiert.

Es ist also bewiesen, dass aïs internationale Masseinheit für Titrierung des Diphtherie- heilserums endgültig die Ehrlich’sche Einheit anzuerkennen ist.

Die Genfer Konferenz hat folgenden Beschluss gefasst :« Um sich zu vergewissern, dass die verschiedenen von den Staaten zwecks

Messung angewandten Seren fortwæhrend gleichwertig bleiben, ist es wünschens- wert, dass Professor M a d s e n , als Direktor des Dænischen Staatlichen Serothera- peutischen Institutes, das für diese Forschung als zentrale Stelle des Hygiene Comités des Vœlkerbundes fungiert, alljæhrlich vergleichende Versuche m it diesen Seren veran- lasse. »

Die authentischen Protokolle der Versuche, die von den verschiedenen Instituten vor- genommen wurden, sind im Drucke begriffen, und werden zu gleicher Zeit mit denen der V er­suche über die Masseinheiten der antitetanischen Seren erscheinen.

Um den Beschliissen der Genfer Konferenz Folge zu leisten, wird das Dænische Staatliche Serotherapeutische Institut in regelmæssigen Zwischenræumen Muster der Standardseren erhalten, um sie auf experimentellem XVege miteinander zu vergleichen. Die Institute der verschiedenen Staaten werden selbstverstændlich auf ihre Anfrage in Kopenhagen ein authen- tisches Muster des Standardserums erhalten kœnnen.

Das Staatliche Serotherapeutische Institut in Dænemark wird alljæhrlich wenigstens ein Mai die Seren untersuchen, die von den verschiedenen Staaten als Masseinheit angesehen werden. Falls diese Untersuchungen eine Aenderung in der Beschaffenheit offenbaren sollten, so soli das betreffende Institut ersucht werden, vergleichende Versuche zu veranstalten. Es soil dabei noch wohl verstanden werden, dass es sæmtlichen Instituten frei steht, zu jeglicher Zeit Proben ihres Standardserums nach Kopenhagen zu senden und zu verlangen, dass es mit der internationalen Masseinheit experimentell verglichen werde.

, 3. Tetanus. — Die internationale Konferenz für Serologie in London hatte folgendenBeschluss in Bezug auf Tetanus gefasst :

« Die vier gegenwærtig zwecks Wertbestimmung des Tetanus-Serums an- gewandten Methoden gehen von verschiedenen Grundeinheiten aus. Bisher liegen noch keine genauen Untersuchungen iiber die zahlenmæssigen Beziehungen dieser vier Methoden vor.

» Die Kommssion hælt es fiir mœglich und wünschenswert eine allgemein anerkannte Massmethode festzusetzen unter Benutzung eines Standard-Serums nach Analogie der Wertbestimmung des Diphtherie-Serums.

» Zu diesem Zwecke sollen zunæchst die zahlenmæssigen Wertbestimmungen, erhalten mit den vier Methoden, genau vergleichbar geprüft werden und für diese Vergleichsuntersuchungen die Standard-Sera und Test-Gifte zwischen den verschie­denen Laboratorien ausgetauscht werden.

» Die von den Laboratorien erhaltenen Versuchsergebnisse sollen m it genauen Protokollen dem Staats Serum-Institut zu Kopenhagen übermittelt und auf der næchsten Konferenz erœrtert werden. »

Vergleichende Untersuchungen sind im Laufe der verflossenen neun Monate von den Instituten Kopenhagen, Frankfurt, Paris und Washington vorgenommen worden. Obgleich diese Versuche ihr Endstadium noch nicht erreicht haben, haben sie es dennoch ermœglicht, eine Einigung zu erzielen, auf internationaler Verabredung fussend.

Vergleicht man die Ergebnisse der Versuche, so werden ungefæhr die folgenden Verhælt- iiisse zwischen den verschiedenen Seren konstatiert :

Das deutsche Serum soli aïs 1 gelten, da ist der Titer des amerikanischen Serums 60 bis 66, der des franzœsischen circa 2.500.

Die Teilnehmer an der Genfer Konferenz haben einstimmig beschlossen, eine zwischen beiden Extremen stehende Einheit zu wæhlen.

Wære das Verhæltnis genau 1 : 50 : 2.500 gewesen, so hætte man dieses Verhæltnis behal- ten kœnnen, als das brauchbarste gemeine Mass. Da dies aber nicht der Fall ist, erkannten die Mitglieder der Genfer Konferenz, dass die je tzt im Gebrauche stehenden Einheiten zu ændern wæren, wenn man zu einem einfachen Verhæltnis gelangen wollte.

Um dies zu erreichen, erbot sich Professor Kolle seiner Regierung vorzuschlagen, die deutsche Einheit zu modifizieren, so dass ihr Verhæltnis m it der amerikanischen Einheit genau 1:50 werde. Er schlug noch vor, diese Einheit durch 100 zu multiplizieren, um sie der Titration des Diphtherie-Heilserums and ie Seite zu stellen, was den Aerzten ihre Aufgabe stark erleichtern würde.

Werden diese Vorschlæge angenommen, so ergiebt sich folgendes Verhæltnis :

Dr M a r t i n bemerkt, dass in diesem Falle das Verhæltnis zwischen amerikanischer und neuer deutscher Einheit 1 : 2 wird ; er schlægt vor die durch zwei multiplizierte amerikanische Einheit, das heisst die neue deutsche Einheit, als internationale Einheit zu erkennen.

Die Kommission schlægt vor, die Titrierung der antitetanischen Sera mit Hilfe des nach obigen Prinzipien angestellten Serums vorzunehmen.

Die Konferenz h a t folglich, im Prinzip, eine internationale Masseinheit fe s tg e s te l l t . Es bleibt nur noch übrig durch eine geeignete Versuchsreihe endgültig, die genauen Verhælt- nisse festzustellen, die zwischen den verschiedenen zur Titrierting des Antitoxingehaltes ver- wendeten antitetanischen Seren existieren.

Die Kommission verlangt wTeiter, dass einzig die Methoden anerkannt werden, die auf Neutralisation des Toxins durch das Tetanus-Antitoxin basieren.

AmerikanischeEinheit

50

Neue deutsche Einheit

100

FranzœsischeEinheit2.500

2 7 -

Das Dænische Staatl. Serotherapeutische Institu t wird, für die durch diese BeschlUsse notwendig gewordenen Versuche, aïs Zentralforschungsstelle des Hygiene Comités des Vœlkerbundes fungieren.

Mit diesem Beschluss der Genfer Konferenz ist auch die Notwendigkeit gegeben, Versuche zu veranstalten, die die jetzige Wertigkeit der neuen Masseinheiten zu bestimmen haben werden. -

4. Folglich hat die Genfer Konferenz endgültig die Frage einer Standardisation des Diph- therie-Heilserums gelœst und im Prinzip eine internationale Einheit ftir antitetanische Seren festgelegt.