EVIDENCIAS FOTOGRÁFICAS:

ENZIMAS MITOCONDRIALES

INTEGRANTES: DANIELA ADAME CANTORTANIA DENNISSE CUADROS SILVALINA SOFÍA POVEDA SÁNCHEZ JUAN DAVID SERNA VANEGAS

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIAFACULTAD DE MEDICINA

I SEMESTRE

MATERIALES Y REACTIVOS

• 10 Tubos de ensayo• 2 Erlenemeyer de 150ml• 1 Vaso de precipitado de

500ml• 1 Mortero con mano• 4 Pipetas de 5ml• 5 Pipetas de 2ml• 2 Tubos de centrífuga• 1 Gradilla• 1 Pipeteador

• Arena Lavada• Buffer Fosfato 0,1M y pH7,4(300ml). --> Cloruro

de sodio 0.9 %• Solución malonato de sodio 1% (100ml),• Solución cianuro de potasio 0,05M (50ml)

PELIGROSO,• Solución de p-fenilendiamina al 1% (100ml) ,• Solución de succinato de sodio al 1% (100ml),• Solución de azul de metileno 0,01% (100ml)m,• Aceite mineral (200ml),• Agua destilada ,• Baño de maría termostato a 37°C ,• Tejido cardíaco fresco,Tejido muscular fresco

deben conseguir tejido de animales recién sacrificados en un matadero, puede ser de porcino o ave [órgano entero ) y mantenerlos refrigerados .Son pequeñas porciones y sirven para todo el grupo ).

PROCEDIMIENTO

EXTRACCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS ENZIMAS Y COENZIMAS: Tomar 5 gr de tejido (hígado) libre de tejido y sangre.

• Se llevo este tejido a un mortero junto con 3 gr de arena lavada y posteriormente se agregaron 3 porciones de NaCl hasta completar un volumen de 15 mL

• Se macero hasta obtener una pasta fina, posteriormente se paso a un Erlenmeyer

• Se coloco en la nevera durante 15 minutos mezclando ocasionalmente

• Luego de los 15 min en la nevera se paso el extracto a 2 tubos de centrifuga para ser centrifugados a 1500 rpm por 10 min

• Mientras se esperaba por el centrifugado de la preparación se rotularon 5 tubos de ensayo a los que se le agregaron diferentes reactivos: (B’,1’,2’,3’,4’)

• Luego se llevo cada mezcla a baño serológico por 10 min a una temperatura de 37° C.

• Después de los 10 min de centrifuga se tomo una cantidad especifica del extracto para agregar a cada tubo sin sacarlo del baño serológico junto con aceite mineral

• Tubos a los 10 minutos de haber agregado el extracto y aceite mineral

5 minutos después….

5 minutos mas tarde….

RESULTADO FINAL

• Simultáneamente se rotularon 4 tubos para la preparación de otra reacción con una tabla indicando diferentes reactivos: (B,1,2,3). Seguimiento de la acción de la Citocromo Oxidasa

• Se mezclo bien y se llevo a baño serológico donde también se llevo un seguimiento cada 5 minutos por periodo de 20 minutos

RESULTADO FINAL DEL EXTRACTO ENZIMÁTICO DE CORAZÓN DEL GRUPO DE MARÍA BELTRAN MENJURA

RESULTADO FINAL DEL EXTRACTO ENZIMÁTICO DE POLLO DEL GRUPO DE SHARON VASQUEZ