manual de para clinica.2.2

8/3/2019 Manual de Para Clinica.2.2

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Facultad de Bioanlisis, Veracruz. Manual de Procedimientos de laboratorio

Parasitologa Clnica 2

Introduccin

El presente manual de Parasitologa Clnica tiene la finalidad de funcionar comogua de trabajo en la experiencia educativa Parasitologa Clnica, la cual seencuentra curricularmente establecida en la retcula del estudiante de Licenciaturade Qumica Clnica.

Mediante este Manual el estudiante conocer, comprender y analizar susconocimientos de Parasitologa, aplicando y desarrollando sus saberes tericos,

heursticos y axiolgicos; debido a que en el laboratorio se requiere que trabaje enun ambiente de respeto, responsabilidad y tica, haciendo uso de sus habilidadesen el manejo de equipo, asi como en el desarrollo de metodologas, previo sustentoterico.

Se incluye un apartado de confiabilidad y control de calidad especifico para cadatcnica descrita.

Una vez efectuada la tcnica en el laboratorio, en el apartado del reporte deresultados, se hace nfasis en el estado diagnstico del parsito con lo que elalumno aprender la forma correcta de reportar los resultados en el mbito laborale integrar sus conocimientos tericos con los prcticos.


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REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE PARASITOLOGIA

1. El alumno debe llegar puntual a su clase.

2. El alumno debe de portar una bata de manga larga de algodn.

3. El alumno debe de asistir a la prctica de laboratorio con su Manual de

Parasitologa Clnica

4. Los libros, cuadernos y objetos personales no deben estar en la mesa de

trabajo.

5. El alumno debe contar con su material necesario para la prctica de

laboratorio correspondiente.

6. El alumno debe limpiar su rea de trabajo con hipoclorito de sodio antes

y despus de la prctica de laboratorio.

7. El alumno tiene prohibido estrictamente comer, beber, y fumar en el

Laboratorio.

8. Durante la prctica de laboratorio el alumno debe usar guantes y cubre-

bocas.9. El alumno debe desechar las muestras con las que se trabaj de acuerdo

a Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002 y a la Gua para

la NOM-087-ECOL-SSA1-2002

10.-En caso de romperse o derramarse muestra fecal deber verterse fenol o

hipoclorito sobre l y dejarlo cuando menos 10 minutos antes de limpiar.


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METODO DE STOLL

1.- INTRODUCCIN

Esta tcnica fue ideada y desarrollada por Stoll en 1923, debido a sus caractersticas deaccesibilidad en costo y material a utilizar es uno de los ms empleados de maneraexitosa en encuestas epidemiolgicas.

Este mtodo forma parte de los exmenes considerados cuantitativos, por lo que esnecesario tener el antecedente de que la muestra se encuentra positiva, para su posteriorcuantificacin.

La tcnica es de utilidad para hacer una evaluacin de la intensidad de ciertashelmintiasis, se debe recordar que los helmintos son metazoarios y dentro de estaclasificacin se encuentran los nematelmintos gusanos redondos tales como; Ascarislumbricoides, Trichuris trichiura, uncinarias (Necator americanus y Ancylostomaduodenale) y Strongyloides stercoralis. Adems tambin se pueden cuantificarplatelmintos (gusanos planos) como; Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta y otrasteniasis.

2.- PRINCIPIO Y METODOLOGA DE LA DETERMINACIN

El fundamento de este mtodo es bsicamente aritmtico, los clculos se basan en las

diluciones empleadas. Debido a que la cantidad de muestra es muy pequea encomparacin con el volumen de hidrxido de sodio, las helmintiosis moderadas son msdifciles de evaluar. Por el hecho de no utilizar tincin temporal y debido a que los quistesse aclaran con el hidrxido es una tcnica especfica para la cuantificacin de helmintiasis.

3.- LISTA DE REQUERIMIENTOS

3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACION CANTIDAD1 Hidrxido de sodio ( ver anexos) 0.1 N 100 ml.


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3.2 Equipos de Laboratorio

1. 30 microscopios.

3.3 Materiales de laboratorio

CANTIDAD DESCRIPCIN30 Pipetas de 2 ml graduadas en milsimas30 Probetas de 10 ml graduadas30 Varillas de vidrio delgada de 20 cm. de longitud.30 Bulbos

150 Perlas de vidrio de 3 Mm. de dm.

30 Guantes30 Aplicadores30 Portaobjetos30 Cubreobjetos

4.- TCNICA O PROCEDIMIENTO

1. En la probeta de 10 ml poner 5.6 ml de la sol. De hidrxido de sodio 0.1 N.2. Agregar materia fecal hasta la marca de 6 ml3. Mezclar con la varilla de vidrio4. Depositar 5 perlas y tapar la probeta

5. Agitar vigorosamente durante 1 min., hasta formar una suspensin homognea.6. Dejar en reposo la probeta 15 minutos, los restos fecales y huevos comienzan airse al fondo.

7. Tomar la pipeta serolgica e introducirla a la parte media de la suspensin.8. Tomar 0.075 ml y colocarlos entre porta y cubreobjeto.9. Observar la preparacin al microscopio con objetivo seco dbil y seco fuerte.10. Se observarn absolutamente todos los campos de la preparacin y se contaranlos huevos encontrados.

4.1 Muestreo y muestra

4.1.1 La Obtencin de muestra debe ser; expulsin de manera natural4.1.2 En frasco de boca ancha etiquetados con; nombre, edad, sexo y fecha.

4.2 Preparacin del sistema de Medicin

4.2.1 Seguir las Instrucciones de limpieza y manejo del microscopio.


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4.3 Uso del sistema de Medicin (Proceso de lectura y / u observaciones)

4.3.1 Enfocar al microscopio la preparacin con objetivo 10 X.

4.3.2 Realizar la lectura de la totalidad de la preparacin de manera sistemtica.4.3.3 Reportar segn indicaciones en el apartado reporte de resultados.

4.3.4 Terminado el proceso apagar el equipo, limpiar y enrollar perfectamente el cordn.

4.3.4 Desechar los materiales de acuerdo con el procedimiento de desecho estndar

5.- PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS

De acuerdo con la formula establecida, calcular la concentracin de la sustancia en las

unidades respectivas.5.1 Calculo de resultados

El nmero de huevos o larvas contados en toda la preparacin se multiplican por lossiguientes factores, segn se haya tomado 0.075 0.15 ml de la suspensin y tambin enconsideracin con la consistencia de la muestra:

HECES MUESTRA FACTORDuras 0.075 200

Pastosas 0.075 400Lquidas 0.075 800Duras 0.150 100Pastosas 0.150 200Liquidas 0.150 400

5.2 Reporte de resultados

El resultado se expresa en huevos o larvas por mililitro de heces (ml lmlh); por ejemplo

si la materia fecal es pastosa y se encontraron 4 huevos de uncinarias en toda lapreparacin:4 X 200= 800

Se reportar: 800 hmlh de uncinarias.

Toda vez obtenidos los resultados, estos se vacan en una libreta o cuaderno control.


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6.- CONFIABILIDAD ANALTICA

6.1 Se recomienda verificar que la cantidad de muestra tomada sea exacta, a fin de noalterar el factor de dilucin.

6.2 Se debe llevar con cuidado la pipeta hasta el centro y parte media de la suspensinde la probeta, ya que esto hace que disminuya el error debido a la sedimentacinrpida de los huevos.

6.3 Se recomienda no Pipetear con la boca, sino con un bulbo micropipetas.

7.- CONTROL DE CALIDAD

Evitar la hidratacin del hidrxido de sodio en el momento de pesar. Usar frasco de tapnde caucho para guardar la solucin.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1 Debe ser un estudiante de Qumica Clnica, Qumico Frmaco bilogo QumicoBilogo parasitlogo con supervisado por el facilitador de la Experiencia Educativa

Bibliografa

Jimnez Cardoso Enedina, Control de calidad en Parasitologa, 1ra edicin, editorialPrado, 2006.

Rodrguez, Atlas de Parasitologa Mdica, 1ra edicin, Mc Graw Hill, 2004.

Lpez Pez Myrian, Atlas de Parasitologa, 1ra edicin, Manual Moderno, 2006

De Haro Irene, Salazar Paz Mara, Diagnstico Morfolgico de las Parasitosis, Edit.Mndez Editores Mxico D.F.1999


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UNIVERSIDAD VERACRUZANAFACULTAD DE BIOANLISIS

REGIN VERACRUZ

NOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________

NOMBRE DE LA PRCTICA: ______________________________________

MUESTRA _____________________________________________________

FUNDAMENTO (INTERPRETACION): _______________________________

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OBSERVACIONES MICROSCOPICAS.-

REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:

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TCNICA DE FERREIRA

1.- INTRODUCCIN

El mtodo fue descrito por Biagi y Cols. En 1959 y fue puesto en practica porFerreira y Abreu. Rene caracterstica de un coproparasitoscopico y de un mtodocuantitativo es til para el recuento de huevos y larvas de todos los parsitos consideradosmetazoarios y adems hace una buena concentracin de los protozoarios: quistes yooquistes.Debido a la utilizacin del tamiz y a los lavados aplicados, se logra una materiafecal fina que facilita su estudio microscpico


Esta tcnica se basa en la utilizacin del formol como preservador y desinfectante y de ladiferencia de densidades con el empleo del sulfato de zinc con una densidad de 1.192,que har que los parsitos existentes en las muestra floten. Tiene como limitante que elmaterial a utilizar no se consigue fcilmente.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONC. CANTIDAD

1 Sulfato de Zinc 35% 500 ml2 Formaldehdo 10% 300 ml3 Sol. Salina 0.9% 500 ml4 Lugol 50 ml


1. 30 microscopios2. 1 centrifuga3. Balanza granataria

4. Campana de Ferreira


CANTIDAD DESCRIPCIN15 Pinzas de presin15 Frasco de Gerber


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15 Aplicadores15 Tubos de ensaye de 100 x 25 mm30 Portaobjetos30 Cubreobjetos

15 Embudo15 Tubos de ltex de 15 cm de largo


1. Pesar un frasco de ancha junto con un abate lenguas

2. Depositar materia fecal en el frasco ayudndose con el abate lenguas

3. Medir 36 ml de la solucin de formaldehdo, vaciar en el frasco

4. Homogeneizar la materia fecal con la solucin de formol hasta que quede unasuspensin.

5. Pasar la mezcla por malla previamente colocada en un embudo y recibir lasuspensin en un tubo colocado en una gradilla.

6. Centrifugar a 2000 rpm. Durante 1 minuto.

7. Decantar el sobrenadante y resuspender el sedimento con sol. Salina.

8. Volver a centrifugar bajo las condiciones anteriores.

9. Decantar nuevamente el sobrenadante y agregar 2 a 3 ml de sulfato de zinc,mezclar hasta hacer una nueva suspensin.

10. Introducir la campana de Ferreira en el tubo de ensaye. Ver Fig.1.

11. Llenar el tubo con ms solucin para que el menisco suba.12. Centrifugar a 2000 rpm. Durante 1 min.

13. Sacar el tubo de la centrfuga y con el pulgar y el ndice se comprimefuertemente el trocito de manguera de caucho del extremo anterior de lacampana y de un golpe se saca este del tubo.

14. Lavar el exterior de la campana.

15. Invertir la campana sobre el portaobjetos y poner 2 a 3 gotas de lugol, de talmanera que arrastren el contenido de la parte estrecha de la campana, que esdonde se encuentran las formas parasitarias.

16. Homogeneizar la suspensin con el ngulo de un cubreobjetos colocar estesobre el portaobjetos

17. Examinar la preparacin con el microscopio seco dbil y seco fuerte. Contartodos los huevos de la totalidad de la preparacin.


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4.2.1. Seguir las Instrucciones de limpieza y manejo del microscopio.

4.3 Uso del sistema de Medicin (Proceso de lectura y / u observaciones)

4.3.1. Enfocar al microscopio la preparacin con objetivo 10X y 40X.4.3.2. Contar la totalidad de la preparacin.


5.1 Calculo de resultados

El nmero total de huevos o larvas encontrados se multiplica por 5; se obtiene de estamanera el nmero de huevos de la totalidad de la preparacin


5.2.1 El resultado se expresa en huevos o larvas por gramos de heces (hgh); porejemplo si se encontraron 10 huevos de Ascaris lumbricoides:9 X 5= 50 hgh

5.2.2 Toda vez obtenidos los resultados, estos se vacan en una libreta o cuadernocontrol.


6.1 Se debe verificar la densidad del sulfato de zinc peridicamente para evitar erroresde concentracin.

6.2 Lavar perfectamente bien las campanas y para tratarlas una vez al mes con mezclacrmica.

6.3 Verificar que el caucho no este roto

6.4 Revisar que las tuercas no estn oxidadas6.5 Hacer los pares correspondientes para evitar que la centrfuga se desbalance


Se recomienda la experiencia del analista en la aplicacin de esta tcnicaSe usan preparaciones de referencia sobre todo en la identificacin de las larvas.


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8.- PRACTICABILIDAD

8.1 Debe ser un estudiante de Qumica Clnica, Qumico Frmaco bilogo Qumico

Bilogo parasitlogo con supervisado por el facilitador de la Experiencia Educativa

Fig. No 1. Campana de Ferreira

Fuente:Biagi F., Enfermedades parasitarias.

9.- Bibliografa

Biagi Francisco, Enfermedades Parasitarias, 3ra edicin, Manual Moderno, 2004



Tay Jorge, Parasitologa, 6va edicin, Mndez Editores, 2010.

Becerril Marco, Parasitologa Mdica, 2da edicin, Mc Graw Hill, 2008.


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REGIN VERACRUZ

NOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


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REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:

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METODO DE KATO KATZ.

FROTE GRUESO

1.- INTRODUCCIN

Este mtodo fue descrito por Kato y Miura en 1954 y antiguamente se denominabacomo; frote grueso fue evaluada por Komiya Kobashi y Martn Beaver, quienesintrodujeron la modificacin de pasar la materia fecal por una malla para evitar el paso defibras y restos alimenticios no digeridos, lo que mejor la tcnica original.Es una tcnica muy sencilla en cuanto a materiales y reactivos a utilizar, en cuantoa los clculos para el reporte de resultados estos no representan mayor problema.

Se usada para diagnosticar helmintiasis y cuantificar el hallazgo de huevos, los resultadosnos dan la concentracin de huevos por gramos de heces.


Este mtodo se fundamenta en la utilizacin de glicerina como aclarante y el verde demalaquita como colorante de contraste, adems de un cubreobjeto de celofnhumedecible, que es el vehculo para la solucin de Kato. En este apartado se debeconsiderar que a travs de este mtodo no se diagnosticaran protozoosis por elaclaracin que produce la glicerina y el verde de malaquita puede enmascarar la finasestructuras de los parsitos unicelulares. Otro dato a tener en cuenta es que cuando se

tratan de parasitosis mixtas como geohelmintiasis con himenolepiosis los huevos de estosltimos son delicados y aclaran mas rpido que los de nematelmintos.


3.1 ReactivosNUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACION CANTIDAD

1 Glicerina QP 100 ml2 Verde de malaquita 3% 3 gr3 Agua destilada -- 100 ml


1. 30 microscopios.2. Estufa de cultivo.


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CANTIDAD DESCRIPCIN30 Cuadros de malla para mosquitero de 10 cm x lado

30 Cuadros de papel celofn de 22 x 40 mm (como portaobjeto)30 Cuadros de cartn de 3 mm de grosor y de 30 mm de lado con unaperforacin en el centro de 6 mm de dimetro.

30 Papel encerado1 rollo Papel absorbente

30 Abatelenguas o Aplicadores30 Portaobjetos


1. Depositar sobre el papel encerado 5 grs de materia fecal2. colocar la malla sobre la materia

3. Presionar la malla para que salga el tamizado.

4. Se efecta una horadacin de 0.6 cm. de dimetro en cartn de cascaron y secoloca sobre un portaobjeto. Ver fig. 2.

5. Dentro del circulo se introduce la muestra de materia fecal (50 mg) .

6. Con sumo cuidado retirar el soporte de papel cascaron o cartn.

7. El excremento quedara en forma cilndrica.

8. Cubrirlo con un fragmento de celofn (22 x 30 mm) que se encuentrapreviamente humedecido con glicerina y verde de malaquita 3% durante 24hrs.

9. Hacer un squash con la ayuda de papel adsorbente, con el propsito deeliminar el exceso de glicerina y de lograr una extensin delgada, apta para laobservacin.

10. dejar reposar durante 20 30 minutos a 37 grados centgrados para aclaracindel material fecal (pero no de los huevos)

11. Examinar al microscopio para su cuantificacin.




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4.2.1. Seguir las Instrucciones de limpieza y manejo del microscopio.

4.3 Uso del sistema de Medicin (Proceso de lectura y / u observaciones)4.3.1 Enfocar al microscopio la preparacin con objetivo 10 X.

4.3.2. Realizar la lectura de la totalidad de la preparacin de manera sistemtica.

4.3.3. Reportar segn indicaciones en el apartado reporte de resultados.

4.3.4. Terminado el proceso apagar el equipo, limpiar y enrollar perfectamente el cordn.

4.3.5 Desechar los materiales de acuerdo con el procedimiento de desecho estndar


De acuerdo con la formula establecida, calcular la concentracin de la sustancia en lasunidades respectivas.


El nmero de huevos contados en toda la preparacin se multiplica por un factor constantede 20;

Si en 50 mg. de la muestra se encontr un huevo, como 1 gr. Tiene 1000 mgs. Se

hace una regla de tres y por consiguiente 1000 dividido entre 50 dar un factor de 20, quees el que se utilizar para multiplicar el nmero de huevos contados en la preparacin.


El resultado se expresa en huevos por gramos de heces (hgh) larvas por gramos deheces (lgh)


6.1 Se debe evitar que el tiempo de aclaracin se exceda, pues esto dificulta la

observacin de los huevos.7.- CONTROL DE CALIDAD

Solo la prctica de la tcnica durante varias veces ayudar a establecer los tiemposespecficos para cada espcimen


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8.- PRACTICABILIDAD



Figura No. 2 material para el mtodo de Kato.

Fuente: Beltrn Fabin M.Tello Casanova R., Naqueira Velarde C., Manual deprocedimientos de laboratorio para el diagnstico de los parsitos intestinales del hombre.

9.- Bibliografa


Beltrn Fabin M.Tello Casanova R., Naqueira Velarde C., Manual de procedimientos delaboratorio para el diagnstico de los parsitos intestinales del hombre.


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Lpez Pez Myrian, Atlas de Parasitologa, 1ra edicin, Manual Moderno, 2006Biagi Francisco, Enfermedades Parasitarias, 3ra edicin, Manual Moderno, 2004


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REGIN VERACRUZ

NOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


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REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:________________________________________________________________________

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METODO DE TAMIZADO

1.- INTRODUCCIN

En ciertas parasitosis es importante tanto para el medico como para el paciente larecuperacin de los parsitos adultos o porciones de ellos a fin de establecer undiagnostico de certeza o de evaluar el efecto de la teraputica empleada.Esta tcnica es utilizada para la recuperacin de parsitos adultos o segmentos de ellosen la materia fecal.

Algunas de la parasitosis en las que puede ser de utilidad el empleo de esta tcnicason; Tricocefalosis en su estadio adulto los cuales se vern como pequeas hebrasde hilo o pequeas porciones de cabello de all su nombre trico= cabello.Uncinariosis en su fase adulto, lo que resulta valioso para la identificacin degenero de uncinaria que parasita a nuestro paciente. Enterobiasis con lo que seestablecera el nematodo causante de la patologa, otros especimenes que seobtienen con este mtodo son las Taenias que son de suma importancia en cuantoa la mortalidad que puede ocasionar Taenia soliumsobre todo en su estadio larval,o como ya se menciono anteriormente al lograr recuperara el escolex despus deun tratamiento nos da el indicio que nuestro paciente se encuentra desparasitadode el temible parasito que es la solitaria.


Es una tcnica que se fundamenta en el uso de diferentes tamices que van del msgrande al mas pequeo los que funcionan como filtros atrapando los materiales burdosque pudieran interferir con la observacin, el mtodo es de especial utilidad en los casosde teniasis, en los que con frecuencia los otros mtodos de rutina dan resultadosnegativos.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIN CANTIDAD

1 Alcohol 70 % 100 ML2 Glicerina Q. P. 20 ML3 Cloruro de Sodio 2 % 50 ML4 Solucin salina 0.9% 1000 ml


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1. 30 microscopios.2. Bao Maria.


CANTIDAD DESCRIPCIN30 Coladera o tamiz30 Cristalizadores1 Termmetro

30 Portaobjetos30 Cubreobjetos

4.- TCNICA O PROCEDIMIENTO1. Se colocan los tamices uno sobre otro en orden decreciente de grosor (el mas

grande arriba y la ms fina al final)

2. Colocar la materia fecal en el tamiz superior, como se muestra en la fig. No. 3.

3. Agregar solucin salina con un chorro suave y mezclando con unabatelenguas, de manera que los esclex-progltidos y/o nemtodos adultosqueden en los tamices.

4. Los parsitos recogidos en el tamiz son lavados en solucin tibia de NaCl al2%, agitndolos prolongadamente para estimular la relajacin y luego se

examinan en fresco.5. Los parsitos grandes se fijan y conservan en formol al 5 o 10%, a 80OC con

una pequea cantidad de glicerol.

6. Los parsitos pequeos pueden fijarse en alcohol al 70%, caliente y conservaren la misma solucin.

7. Los trematodos y progltidos pueden examinarse comprimindolos entreportaobjetos.


Se reportar la fase parsita encontrada, con su gnero y especie.


No se practican clculos.


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El resultado se expresa en fase, genero y especie.

6.- CONFIABILIDAD ANALTICAA los pacientes que tengan indicado tratamiento contra teniosis y tamizado posterior,

se les pedir que recolecten la totalidad de la materia fecal evacuada en 24 o 48 hrs. Enfrasco limpio y de boca ancha y que no se contamine con orina.


Se utilizaran lminas de referencia como control de calidad.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1 Debe ser un estudiante de Qumica Clnica, Qumico Frmaco bilogo QumicoBilogo parasitlogo con supervisado por el facilitador de la Experiencia Educativa

Fig. 3 Tamizado de materia fecal Fuente: Tay J. Lara, Gutirrez, Velazco, Parasitologa

Mdica.

9.-Bibliografa



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Gmez Marn Jorge E., Protozoologa Mdica, 1ra edicin Manual Moderno, 2010.




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REGIN VERACRUZ

NOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


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REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:________________________________________________________________________

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METODO DE SEDIMENTACIN DE RITCHIE.

1.- INTRODUCCIN

Esta tcnica forma parte de una serie de anlisis coproparasitoscopicos considerados deconcentracin fue descrita por Ritchie en 1948, es de utilidad para la bsqueda de huevosquistes y larvas. Es empleada cuando no se observan parsitos en el mtodo directo ypara aumentar la probabilidad de observar parsitos en las muestras estudiadas.Algunas referencias no indican el uso de malla o gasa al aplicar el mtodo (verapartado de tcnica) por lo que se pueden obtener sedimentos sucios y no con lacalidad requerida para un optima observacin.


Es fundamento de la tcnica se basa en el uso de la fuerza centrfuga que obligara a losparsitos a ir al fondo del tubo, del ter que elimina los detritus orgnicos, mientras que elformol ayuda a mantener la integridad de las formas parasitarias que se concentran.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIN

CANTIDAD

1 Formaldehdo 40 % 500 ML2 Eter etlico o de petrleo Q. P. 300 ML3 Solucin salina 0.9% 1000 ml


1. 30 microscopios.


CANTIDAD DESCRIPCIN30 Coladera30 Embudos30 Gradillas30 Pipetas Pasteur30 Portaobjetos


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30 Cubreobjetos


1. Diluir 2 grs. De heces en 5 ml de solucin salina fisiolgica.2. Filtrar la solucin obtenida sobre colador y embudo.3. Centrifugar durante 5 minutos a 2500 r.p.m.4. Eliminar el sobrenadante.5. Volver a lavar si es necesario6. Al sedimento agregar 3 ml del formaldehdo al 40 % y 2 ml de ter.7. Tapar el tubo y agitar enrgicamente8. Centrifugar 3 mins a 2500 r.p.m. (entre el ter y el formaldehdo se formar un

tapn de grasa y materiales orgnicos)9. Del sedimento tomar una muestra con la pipeta Pasteur

10. Colocar la muestra entre portaobjeto y cubreobjeto

11. Observar al microscopio con 10 X y posteriormente con 40 X.12. Reportar.


Se reportar la fase del parsito, con su gnero y especie.



5.2 Reporte de resultadosEl resultado se expresa en fase, genero y especie y cruces por campo.


6.1 Se deber introducir la pipeta Pasteur para la toma de la muestra del fondodel tubo con el mayor cuidado, pues se pueden presentar problemas almomento de la observacin por el arrastre de grasa.


Se utilizaran lminas de referencia como control de calidad.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1 Debe ser un estudiante de Qumica Clnica, Qumico Frmaco bilogo QumicoBilogo parasitlogo con supervisado por el facilitador de la Experiencia Educativa.


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9.- BIBLIOGRAFA








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REGIN VERACRUZNOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


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REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:________________________________________________________________________

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METODO DE CONCENTRACIN DE EXPECTORACIN.DISTOMIASIS PULMONAR

1.- INTRODUCCIN

Se trata de una tcnica de concentracin y aclaracin en una muestra de expectoracinsencilla y til para la bsqueda de distomas como; Paragonimus.

El Paragonimus mexicanuses un organismo parasito que se adquiere por la ingestin decangrejos y acociles contaminados y tiene predileccin por las vas pulmonares en las quepuede ocasionar alteraciones tales como; tos, disnea esputo hemoptoico, lo que puede serconfundido con una tuberculosis pulmonar u otras afecciones del tracto respiratorio por loque se requiere de un diagnostico diferencial.


El mtodo se basa en el uso de la fuerza centrfuga para sedimentar los elementosformes y en el uso de una solucin de hidrxido de sodio para aclarar la muestra.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIN CANTIDAD

1 Hidrxido de sodio 3 % 500 ML


1. 30 microscopios.2. 1 centrifuga


CANTIDAD DESCRIPCIN

30 Tubos cnicos30 Gradillas30 Pipetas Pasteur30 Bulbos30 Portaobjetos30 Cubreobjetos


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1. En el recipiente donde se recolecto la muestra aadir una parte igual de

hidrxido de sodio al 3 %.2. Mezclar muy bien durante 3 mins.3. Depositar toda muestra en un tubo cnico.4. Centrifugar 5 mins. A 5000 r.p.m.5. Desechar el lquido sobrenadante.6. Con una pipeta Pasteur tomar del fondo del tubo y depositar entre porta y

cubreobjeto7. Examinar la preparacin al microscopio con 10X y 40X


Se reportar la fase del parsito, con su gnero y especie.5.1 Clculo de resultadosNo se practican clculos.


El resultado se expresa en fase, gnero y especie del parsito. La intensidad se reportaen cruces por campo.


6.1 La toma de muestra debe ser expectoracin y no saliva.


Se utilizaran imgenes de referencia como control de calidad.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1 El analista debe ser un Qumico Clnico, Qumico Frmaco bilogo Qumicobilogo parasitolgo con entrenamiento supervisado.

9.-BIBLIOGRAFA.

Lpez Pez Myrian, Atlas de Parasitologa, 1ra edicin, Manual Moderno, 2006



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Tay Jorge, Parasitologa, 6va edicin, Mndez Editores, 2010.Becerril Marco, Parasitologa Mdica, 2da edicin, Mc Graw Hill, 2008.Gmez Marn Jorge E., Protozoologa Mdica, 1ra edicin Manual Moderno, 2010.




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REGIN VERACRUZNOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


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REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:________________________________________________________________________

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BSQUEDA DE HUEVOS DE Schistosoma haematobium

1.- INTRODUCCIN

Es una tcnica sencilla que trata de concentrar los elementos formes de la orina, entreellos las formas parsitas.Schistosoma haematobium es un parasito plano que afecta la vejiga urinaria,urteres produciendo estenosis uretral, infeccin crnica y grave, hidronefrosishasta uremia.La morfologa del huevo son elpticos, presenta una cubierta transparente, pardoamarillenta porosa y cubierta con microvellosidades, tienen un espoln que lo fijana los capilares sanguneos adems contienen enzimas lticas.

El parsito adulto macho mide de 6.4 a 12 mm de longitud y de 2 a 4 mm de ancho esde color grisceo pliega su cuerpo formando un canal ginecforo ventral que le dael aspecto cilndrico donde se coloca la hembra. El nmero de testculos es de 6 a9.

Parsito adulto hembra mide de 7.2 a 17 mm de longitud, son cilndricos, lasglndulas vitelgenas ocupan la mitad posterior del cuerpo el ovario se encuentraen la mitad anterior. En el extremo posterior hay un receptculo seminal en formade retorta. El tero es corto. Tanto el macho como la hembra tienen dos ventosasuna oral y otra ventral. Poseen una cola en forma de tenedor bifurcada. Son la

fase infectante.


El mtodo se basa en la sedimentacin por centrifugacin de los elementos formes (entreellos los huevos de Schistosoma)


3.1 Reactivos

No se requieren reactivos


1. 30 microscopios.


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2. 1 centrifuga.


CANTIDAD DESCRIPCIN30 Tubos cnicos30 Gradillas30 Pipetas Pasteur30 Bulbos30 Portaobjetos30 Cubreobjetos


1. Centrifugar la orina a baja velocidad en tubos cnicos durante 5 mins.2. Desechar el sobrenadante3. Mezclar perfectamente el sedimento4. Servir entre portaobjetos y cubreobjetos5. Observar en 10X y 40X.






El resultado se expresa en fase, gnero y especie del parsito. La intensidad se reportaen cruces por campo.


6.1. Antes de recolectar la muestra pedir al paciente que ejecute 20 sentadillas o

que suba o baje las escaleras rpidamente, de esta manera se excretar la mayorcantidad de huevos.




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8.- PRACTICABILIDAD


9.-BIBLIOGRAFA.



Mara Beltrn Fabin de Estrada, Ral Tello Casanova, Csar Nquira Velarde, Manual de

procedimientos de laboratorio para el diagnstico de los parsitos intestinales del hombre.Serie de Normas. Tcnicas N 37. Lima 2003





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REGIN VERACRUZ

NOMBRE: ______________________________________________________

FECHA: _______________________________________________________


MUESTRA _____________________________________________________


______________________________________________________________


REPORTE________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

CONCLUSIONES:

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EXAMEN COPROLGICO FUNCIONAL

1.- INTRODUCCIN

En este mtodo se realizar un estudio de las heces fecales, tanto Fsico-Qumico-Citolgico-coproparasitoscopico a las cuales se les har una inspeccin del contenido detoda la muestra y se les efectuarn tcnicas para la deteccin de parsitos, bacterias yotras alteraciones gastrointestinales.

El examen coprolgico de las heces tiene su mxima indicacin clnica en las diarreas

crnicas, y en general interesa en procesos que cursan con insuficiencia digestiva o en

aquellas en que se busca bacteria o parsito causante de la enfermedad; comprende la

observacin directa, macroscpica, anlisis organolptico o fsico, el anlisis qumico,

bacteriolgico y parasitolgico de la deposicin.

Para practicar un examen coprolgico hay que recomendar hacer una inspeccin

conciente de las muestras, pues los hallazgos pueden variar notablemente y en distintos

campos microscpicos; llevando un examen a conclusiones errneas; conviene evitar que

la orina se mezcle con la deposicin; y el clnico la examinar.

Un estudio riguroso afines de investigacin requiere de la aplicacin de mtodos

qumicos de balance, conociendo exactamente la proporcin de la dieta y la cantidad deheces. Para el uso clnico corriente basta la observacin microscpica de heces con las

cinco preparaciones clsicas, sin teir, con lugol, con sudn, cido actico y Giemsa.


El examen coprolgico de las heces tiene su mxima indicacin clnica en las diarreascrnicas y en general interesa en procesos que cursan con insuficiencia digestiva o enaquellas en que se buscan bacterias o parsitos causantes de la enfermedad; se

fundamenta en la observacin directa al microscopio, anlisis organolptico o fsico, elanlisis qumico, bacteriolgico y parasitolgico de la deposicin.


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3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACION CANTIDAD1 cido tricloroactico 5 % 500 ML2 NaOH 10 % 500 ML3 Lugol parasitologico 50 ML4 Solucin de Sudn ---- 50 ML5 ter Q.P. 500 ML6 Solucin de Benedict ---- 300 ML7 Solucin de Piramidn 3% 100 ML8 cido actico 36% 150 ML9 Agua oxigenada (H2O2) 3% 150 ML10 HCl 5% 150 ML

11 Cloruro frrico 3% 300 ML12 amoniaco Q.P. 20 ML13 Ac. clorhdrico Q. P. 50 ML


30 microscopios.1 centrifuga


CANTIDAD DESCRIPCION30 Tubos de ensayo de 15 x 150

300 Tubos de ensayo de 13 x 10030 Cubreobjetos30 Abatelenguas30 Aplicadores2 Goteros

30 Papel pH15 Pipetas de 5 ml3 Pinzas para tubo

15 Gradillas30 Portaobjetos


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EXAMEN FISICO O CARACTERES ORGANOLPTICOS

Cantidad Normal 150 200 grs.

Color Pardo (presencia de coprobilingeno)Amarillo (en lactantes)Gris (presencia de cacao o chocolate)Verde (ingestin de vegetales o medicamentos colomelanos)Negro (hierro y bismuto)

Amarillo oro (ruibarbo o xantoninas)Olor Normal o Sui gneris

Agrio y Rancio (en lactantes debido a cidos grasos)Ptrido (en diarreas graves)Ftido (lesiones sifilticas o ulceras del recto)

Aspecto Heces normales (son blandas pero moldeadas)Duro (estreimiento)SemilquidasLquidas

Blanda no moldeada, pastosa

EXAMEN MACROSCOPICO

Restos de alimentos Se observan fragmentos de alimentos y semillas no digeridas.

Cuerpos extraos Objetos ingeridos por los nios, p. ej. Botones pequeos, etc.

Sanguinolento Sangre macroscpica.Disentera aguda, enteritis amibiana y en leo colitis

Moco Normalmente se presenta en pequeas cantidades:ntimamente ligado a la materia fecalAbundante: se presenta en caso de irritacin e inflamacin delintestino y del colon.


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Parsitos adultos y progltidos Se observan parsitos como por Ej. Ascarislumbricoides, taenias, Trichuris trichiura, oxiuros o progltidos.

EXAMEN QUMICO

Reaccin pH Neutra (es normal)Ligeramente cida (en lactantes)Ligeramente alcalina (6.9 7.2)

Mucina 3 ml de materia fecal diluida, agregar una gota de amoniaco y 2ml de cido. actico al 1/3 .

Interpretacin: Si forma opacidad, la reaccin es POSITIVAAlbmina compleja 3 ml de materia fecal diluida

2 ml de cido tricloroacticoInterpretacin: en caso POSITIVO se observa precipitadoSe debe realizar un blanco con agua

Albmina desintegrada 2 ml de materia fecal diluida0.5 ml de c. tricloroactico e incubar 37OC por 30

Interpretacin: en caso POSITIVO se observa precipitado

Peptonas 2 ml de materia fecal diluida0.5 ml de NaOHIncubar por 30Interpretacin: en caso POSITIVO, se observa precipitado.

Almidones Suspender una gota de materia fecal diluida1 o 2 gotas de sol. de lugolInterpretacin:

Cuando el almidn es digerido se colorea de ROJOCuando el almidn no es digerido se colorea de AZUL

Grasas neutras Preparar una lmina con emulsin de heces y agregar una gotade negro de Sudan.Interpretacin: La reaccin positiva se evidencia por lapresencia de gotas negrasEl numer de gotas de grasa observadas se emplea paradeterminar de manera aproximada el porcentaje del contenido degrasa en heces.


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Los individuos con menor excrecin de grasa deben depresentar menos de 10 gotas por cada 10 campos.

Jabones Se observan como agujas dispuestas en racimos o abanicoscortos y planos, escamas gruesas que el calor no funde ni sedisuelven en ter

Azucares reductores:MONOSACARIDOS 2.5 ml de materia fecal diluida

1 ml de sol. de BenedictCalentar a ebullicin por 5

Interpretacin.Coloracin verde: NEGATIVAColoracin precipitado caf: POSITIVA

DISACRIDOS 2.5 ML de suspensin de materia fecal1 ml de cido clorhdricoEbuir 5 mins.Centrifugar a 3000 r.p.m. durante 5 mins.Al sobrenadante agregar 1 ml de BenedictEbuir durante 5 mis.Interpretacin:Coloracin verde =NEGATIVAColoracin caf = POSITIVA.

Hemoglobina 1 ml de suspensin de heces0.5 ml de c. Actico 1/120.5 ml de Piramidn 3 %0.5 ml de agua oxigenada 3%

Mezclar con un aplicador o varilla de vidrio.Interpretacin: POSITIVO, color azul

Bilirrubinas 1 ml de emulsin de heces fecales1 ml de HCl al 5%1 ml de cloruro frrico al 3%Mezclar

Nmero aproximado de gotas Cantidad aproximada de grasa

10 5 %20 10 %30 15 %35 20 %40 30 %


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Usar un blanco con aguaInterpretacin:

POSITIVO: coloracin verdeNEGATIVO: no se presenta cambio de coloracin.

EXAMEN MICROSCPICO

Fibras musculares Aparecen como cilindros estriados transversales con extremosseccionados en sentido perpendicular al eje y muestran ncleosbien conservados en digestiones deficientes. Mientras que, endigestiones completas sus extremos redondos no muestranninguna estra o solo huellas con ausencias de ncleos.

Tejido conjuntivo Forman vainas amarillentas con estras longitudinales.

Tejido elstico Presenta fibras ramificadas bien aparentes.

Cristales Observacin de cristales de oxalato de calcio, principalmentepor ingestin de vegetales.

EXAMEN COPROPARASITOSCOPICO

Se realizarn las tcnicas en:

Fresco para la observacin de trofozoitos.Flotacin

Tcnicas de concentracinPara la observacin de huevosy quistes

Sedimentacin

Tcnica de tamizado: observacin de parsitos adultos.

EXAMEN CITOLGICOSe realiza un frotis del moco y se fija con alcohol, se tie por la tcnica de Giemsa para laobservacin de eritrocitos, en caso de sangre fresca y de Leucocitos como; Linfocitos yPolimorfonucleares en caso de un proceso infeccioso o inflamatorio.


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COPROCULTIVO

Se realizan inoculaciones de las heces fecales en medios de cultivos selectivos para laidentificacin de bacterias, vibrin y levaduras.

4.1 Muestro y muestra

Es necesario que la materia fecal sea recin recolectada.


Reportar de acuerdo al formato incluido en el apartado de reporte de resultados.

5.1 Clculo de resultadosNo se practican clculos.



6.1. La muestra debe ser reciente y evitar contaminaciones con orina u otro material.6.2. El primer examen a efectuar una vez recibida la muestra debe ser el Coprocultivo.

7.- CONTROL DE CALIDADComo control de calidad para el cultivo se introduce una caja con los agares a utilizar en laestufa de cultivo (sin sembrar)Se debe tener cuidado en el manejo de cada uno de los reactivos empleados, algunoscausan irritacin de vas respiratorias, de la piel y mucosas.Se deben emplear muestras de referencia.

8.- PRACTICABILIDAD



9.- BIBLIOGRAFA.

Lpez Pez Myrian, Atlas de Parasitologa, 1ra edicin, Manual Moderno, 2006.


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Biagi Francisco, Enfermedades Parasitarias, 3ra edicin, Manual Moderno, 2004.


Becerril Marco, Parasitologa Mdica, 2da edicin, Mc Graw Hill, 2008.Gmez Marn Jorge E., Protozoologa Mdica, 1ra edicin Manual Moderno, 2010.




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REGIN VERACRUZ

NOMBRE: _________________________________________________

FECHA: ___________________________________________________

NOMBRE DE LA PRCTICA: __________________________________

MUESTRA ________________________________________________

FUNDAMENTO (INTERPRETACION) : __________________________

______________________________________________________________

Citologa de heces ______________________________________________

Examen fsico:

Cantidad _______________________________________________________Color __________________________________________________________

Olor __________________________________________________________Aspecto________________________________________________________

Examen macroscpico:Restos de alimentos ______________________________________________Cuerpos extraos ________________________________________________Sangre ________________________________________________________Moco __________________________________________________________Parsitos adultos ________________________________________________

Examen microscpico

Fibras musculares _______________________________________________Tejido conjuntivo _________________________________________________Tejido elstico ___________________________________________________Cristales _______________________________________________________

Examen qumico:Ph ____________________________________________________________


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Albmina compleja _______________________________________________Albmina desintegrada ____________________________________________Peptonas ______________________________________________________Almidones ______________________________________________________

Grasas neutras __________________________________________________Monosacridos __________________________________________________Disacridos _____________________________________________________Hemoglobina ___________________________________________________Bilirrubina ______________________________________________________Mucina ________________________________________________________

Coproparasitoscpico:


Coprocultivo: __________________________________________________________

CONCLUSIONES:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________


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DE PROGLOTIDOS Y TREMATODOS

1.- INTRODUCCIN

En esta tcnica se podrn identificar los progltidos de las diferentes tenias, as comotambin trematodos por la tcnica de tinta china.

Taenia Saginataposee Progltidos los cuales se clasifican como ; inmaduros, maduros ygravidos. los Progltidos maduros son cuadrados, el ovario es bilobulado. Progltidosgrvidos son largos. Posee de 15 a 30 ramas uterinas poco ramificadas, las ramasuterinas se teirn con la tinta china lo que facilitara la cuenta de las mismas.Mientras que los Progltidos maduros de Taenia solium son cuadrados, el ovario es

trilobulado.Progltidos grvidos son largos, tiene menos de 12 ramas uterinas muy ramificadas ygruesas


Para poder diferenciar los progltidos de las diferentes especies tenias se requiere de lainvestigacin de las ramas uterinas, lo mismo que para poder estudiar los trematodos esnecesario el uso de una tcnica para su tincin como la de la tinta china.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIN CANTIDAD1 Glicerina Q. P. 300 ML2 Ac. actico 5% 500 ML3 Etanol 70 y 95% 500 ML4 Ac. fnico 75% 300 ML5 Tinta china comercial 50 ml.5 Xilol 25% 300 ML


1. 30 microscopios.


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CANTIDAD DESCRIPCIN30 Portaobjetos

15 Jeringa hipodrmica de 2 ml15 Agujas no. 25 2 cm15 Vasos de precipitado de 250 ml


1. Pueden aclararse los progltidos y trematodos completos con ac. actico al 5%hasta disolver los corpsculos calcreos, o por adicin gradual de glicerina.

2. Tambin se aclaran despus de breve conservacin con alcohol de 70%. En

inmersin de Fenol-Xilol (ac. fnico 75% y Xilol 25%). Deshidratacin enalcohol al 95%.

3. Si el tero de los progltidos no contiene huevos dificultndose la identificacinse proceder:

a) A inyectar tinta china en el tronco uterino central usando una jeringahipodrmica de 1-2 ml y aguja no. 25 de 2 cm.

b) Despus de la inyeccin se lava el exceso de tinta en la superficie.c) Se comprime el progltido entre dos portaobjetos y se observa.






Reportar Gnero y especie del parsito, as como la tcnica realizada.


6.1. Los especimenes ya identificados se montan en blsamo de Canad o resinasinttica, para lo cual se requiere supervisar la calidad de estos reactivos.


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6.2 Es necesario realizar un correcto etiquetado del parsito, estadio, fecha ynombre del proceso.



8.- PRACTICABILIDAD


9.- BIBLIOGRAFA





Haro Arteaga I., Salazar Schettino P., Cabrera Bravo M. ,Diagnostico morfolgico de lasparasitosis. Mndez editores. 1999. Mxico D. F.



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COLORACIN PARA PLATELMINTOS

1.- INTRODUCCIN

Las preparaciones teidas con montaje fijo son de utilidad para el diagnostico de lasparasitosis porque facilitan la observacin de algunas estructuras internas del parsito queresultan clave para la identificacin del mismo


La presente tcnica se basa en un proceso de fijacin, seguido de una deshidratacin hidratacin segn sea el caso, para posteriormente seguir con la fase del colorante,aclaracin y montaje.


3.1 Reactivos

NUM. NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACION CANTIDAD1 Orcena Q.P. 300 ML2 c. Actico Q. P. 500 ML3 Agua destilada 500 ML4 c. Clorhdrico Q. P. 4 ML5 Alcohol etlico 95% 50 ml.6 Alcohol absoluto 200 ML7 Xilol Q. P. 200 ML8 Resina Sinttica 10% 50 ML

9 Aceite de clavo Q. P. 300 ML3.2 Equipos de Laboratorio

1. 30 microscopios.


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CANTIDAD DESCRIPCIN10 Portaobjetos de 6 mm de espesor

5 Frascos de vidrio5 hojas de bistur8 Vasos de koplin5 Pincel


1. Los especimenes se colocan entre dos portaobjetos de 6 mm de grosor, porcapilaridad se impregnan con la solucin de Orcena actica.

2. Dejar de 4 a 6 hrs.

3. Cuidadosamente levantar el vidrio que cubre a los parsitos y recuperarlos conun pincel o con la ayuda de una hoja de bistur

4. Colocarlos en un frasco con Orcena actica, taparlos y dejar actuar en el fijadordurante 8 das.

5. Sacarlos y poner a diferenciar en alcohol cido de 2 a 24 hrs. El tiempodepender de la aclaracin para observar las ramas uterinas.

6. Pasar por 4 cambios de alcohol de 95 %, 2 de absoluto y 2 de xilol, 5 minutoscada uno.

7. Aclarar con aceite de clavo

8. Montar con resina sinttica.


Se reportar la fase del parsito, con su gnero, especie.




Reportar Gnero y especie del parsito, as como la tincin empleada.


Los mejores resultados de una tincin se obtienen cuando esta se realiza en el menortiempo posible.


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Se deben estandarizar cuidadosamente los tiempos de tincin.


Se utilizaran imgenes de referencia como control de calidad, las mismas laminas fijadaspueden emplearse para capacitacin del personal como control de calidad.

8.- PRACTICABILIDAD

8.1. Debe ser un estudiante de Qumica Clnica, Qumico Frmaco bilogo QumicoBilogo parasitlogo con supervisado por el facilitador de la Experiencia Educativa.

9.-BIBLIOGRAFA

Haro Arteaga I., Salazar Schettino P.,Cabrera Bravo M.,Diagnostico morfolgico de las

parasitosis. Mndez editores. 1999. Mxico D. F.Atas A., Parasitologa Mdica, Editorial Mediterrneo, 1999, Santiago de Chile.

Biagi F., Enfermedades parasitarias, Editorial la Prensa Medica Mexicana,17 reimpresin,2000, Mxico D. F.

Tay J., Lara, Gutirrez, Velazco, Parasitologa Mdica, Mndez editores, sexta edicin1996, reimpresin 2000, Mxico D. F.

Beltrn Fabin M., Tello Casanova R., Naqueira Velarde C.,Manual de procedimientos de

laboratorio para el diagnstico de los parsitos intestinales del hombre. Editor LeonidLecca Garca, 2003, Lima Per.

Lpez Pez M., Corredor Arjona A., Nicholls Orejuela, Atlas de Parasitologa, editorialManual moderno.2006, Colombia.


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ANEXOS

PREPARACION DE REACTIVOS

Solucin 0.1 N de hidrxido de sodio

- Se pesan 4 g de hidrxido de sodio lo ms rpido posible para evitar la hidrataciny la alteracin del peso, se coloca en un matraz volumtrico de un litro. Se agreganunos 100 a 200 ml de agua y se disuelve. Se afora el matraz a la marca y se agitapara homogenizar la solucin. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DEGAUCHO. NO SE DEBE UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pueslos hidrxidos de potasio y sodio disuelven el vidrio y se sellan los frascos.

Sulfato de zinc 33%

Sulfato de zinc 33 grs.Agua destilada.aforar a 100 ml.

Disolver el sulfato de zinc en el agua destilada en un matraz de vidrio adecuadoutilizando un agitador magntico.

Ajustar a la gravedad especfica () a 1.18 por la adicin de sulfato de zinc o aguadestilada, segn sea el caso.

En el caso de muestras frescas formalinadas usar sulfato de zinc con gravedadespecifica () de 1.20.

Aforar y guardar el frasco de vidrio con tapn de rosca. Marcar el nombre del reactivo, la concentracin y la fecha de caducidad de doce

meses posterior a la fecha de elaboracin. Almacenar a 4 C. Checar la gravedad especifica ante de usar.


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Formaldehdo 10%

Se disuelven 10 ml de formaldehdo en 90 ml de agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

Sol. Salina 0.9%

Se pesan 9 g NaCl, se disuelven en agua destilada y se completa el volumen a1000 ml en matraz volumtrico.

Verde de malaquita 3%

Se disuelven 3 g de verde de malaquita en 100 ml de agua y se guarda en frasco

mbar con tapn esmerilado.

Solucin de verde de malaquita y glicerina

Se mezclan 1 ml de solucin de verde de malaquita, 100 ml de glicerina pura y 100ml de agua, se homogenizan y se guarda la solucin, que es estable durante muchotiempo, en un frasco mbar de boca ancha y tapa de baquelita. Se recomiendacortar los cuadros decelofn y mantenerlos dentro del frasco con la solucin detrabajo y as, siempre tendremos el material listo.

Soluciones alcohlicas a partir de alcohol de 95%.

El alcohol del comercio viene a una concentracin de 95%; como resulta demasiadocaro el uso de alcohol absoluto para hacer soluciones alcohlicas deconcentraciones variables, se puede partir de 95%, si se toma en consideracin lasiguiente regla. Es necesario recordar que el alcohol tiene qu ser puro de caa,pues el desnaturalizado, por contener sustancias que lo hacen tener mal sabor, hayinterferenciaen los procesos de tincin.

Alcohol 70%

Se mezclan 70 volmenes de alcohol de 95% y 30 volmenes de agua destilada.

Cloruro de sodio 2%


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Se pesan 20 g NaCl, se disuelven en agua destilada y se completa el volumen a1000 ml en matraz volumtrico

Formaldehdo 40%

Se disuelven 40 ml de formaldehdo en 60 ml de agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

Hidrxido de sodio 3%

Se pesan 3 g de hidrxido de sodio lo ms rpido posible para evitar la hidrataciny la alteracin del peso, se lleva 100 ml de agua destilada, se agita parahomogenizar la solucin. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DE CAUCHO.NO SE DEBE UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pues loshidrxidos de sodio disuelven el vidrio y se sellan los frascos.

Acido tricloroactico 5%

Se disuelven 5 ml de acido tricloacetico e se llevan a 100 ml de agua destilada y seguarda en frascos con tapn hermtico no metlico.

NaOH 10%

Se pesan 10 g de hidrxido de sodio lo ms rpido posible para evitar la hidrataciny la alteracin del peso, se agregan 100 ml de agua destilada, se agita parahomogenizar la solucin. Se guarda en un FRASCO CON TAPON DE CAUCHO.NO SE DEBE UTILIZAR FRASCO CON TAPON ESMERILADO, pues loshidrxidos de sodio disuelven el vidrio y se sellan los frascos.

Lugol parasitolgico

Solucin madre

Se disuelven 10 g de yoduro de potasio en 100 ml de agua destilada y en seguidase agregan 5 g de yodo cristaloide, se agita constantemente para que se disuelva la


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mayor cantidad posible, se guarda en frasco mbar. No importa que quede excesode yodo en el fondo; esto se hace para que la solucin permanezca con laconcentracin deseada durante mucho tiempo e inclusive se puede reintegrar elvolumen con adicin de agua destilada.

Solucin de trabajo de lugol

Se mezclan volumen a volumen solucin madre de lugol y agua destilada. Sesugiere evitar los frascos goteros con bulbo de caucho porque el lugol los destruyerpidamente, es mejor utilizar frascos goteros especiales con tapn esmerilado.

Solucin de piramidn 3%

Se disuelven 3 ml de piramidon en 100 ml destilada y se guarda en frascos contapn hermtico no metlico.

Acido actico 36%

Se disuelven 36 ml de acido actico en 100 ml de agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

HCl 5%

Se disuelven 5 ml de acido clorhdrico en 100 ml de agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

Cloruro frrico 3%

Se disuelven 3 ml de cloruro frrico en 100 ml agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

Ac. actico 5% Se disuelven 5 ml de acido actico en 100 ml de agua destilada y se guarda en

frascos con tapn hermtico no metlico.

Ac. fnico 75%


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Se disuelven 5 ml de acido fnico en 100 ml de agua destilada y se guarda enfrascos con tapn hermtico no metlico.

Xilol 25%

Se disuelven 25 ml de xilol en 100 ml de agua destilada y se guarda en frascos contapn hermtico no metlico.

manual de para clinica.2.2

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